一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ005082 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ005082 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ005082 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:phospho-CSK (Ser364)
中文名称:磷酸化酪氨酸激酶C-SRC抗体
别 名;CSK(phospho S364); p-CSK(phospho S364); C SRC;
C SRC kinase; C src Tyrosine Kinase; C-SRC kinase; c-src tyrosine kinase; Csk
A; CSK; CSK_HUMAN; CYTOPLASMIC TYROSINE KINASE; EC 2.7.10.2; MGC112926;
MGC117393; MGC154049; P60 Src; Protein tyrosine kinase CYL; Protein-tyrosine
kinase CYL; Proto oncogene tyrosine protein kinase; Tyrosine protein kinase
CSK; Tyrosine-protein kinase CSK; zgc:154049.
产品类型;磷酸化抗体
研究领域;细胞生物 信号转导 激酶和磷酸酶
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Rat, (predicted: Mouse, Chicken, Pig, Cow, Horse,
Sheep, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;51kDa
细胞定位;细胞浆 细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthesised
phosphopeptide derived from human CSK around the phosphorylation site of
Ser364: KF(p-S)TK
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Specifically phosphorylates 'Tyr-504' on LCK, which acts as a negative regulatory site. Can also act on the LYN and FYN kinases.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
β-EPELISAKit |
人半乳糖(Galactose)elisa分析检测试剂盒 |
大鼠肺炎病毒抗体(PV-Ab)elisa分析检测试剂盒 |
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PV-Ab Elisa kit |
金属调节转录因子2抗体 |
豚鼠白蛋白elisa分析检测试剂盒 |
MTF2 |
大量/酵母细胞基因组DNA纯化试剂盒 |
小鼠胰岛素受体底物2(IRS2)elisa检测试剂盒 |
GuineaPigAlbuminELISAKit |
21号染色体开放阅读框91抗体 |
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C21orf91 |
鱼类白介素1α(IL-1α)elisa检测试剂盒 |
RAS抑制蛋白1抗体 Anti-RIN1 |
大鼠抗/血管加压素/精氨酸加压素(ADH/VP/AVP)elisa检测试剂盒 |
谷氨酸受体2B抗体 Anti-NMDAR2B |
仓鼠E选择素(SELE)elisa分析检测试剂盒 |
微管相关源蛋白TPX2抗体 Anti-TPX2 |
SELE ELISA kit |
磷酸化信号转导和转录激活因子6抗体 Anti-phospho-STAT6(Tyr641) |
人抵抗素样分子β(RELM-β)elisa分析检测试剂盒 |
APC标记的兔抗人IgM |
HumanRELM-βELISAKit |
Rabbit Anti-Human IgM / APC |
组织MAPKAP KINASE3激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
磷酸化Runx3抗体 |
磷酸化酪氨酸激酶C-SRC抗体p164 ROCK 2; p164 ROCK-2; Rho associated coiled coil containing protein kinase 2; Rho associated protein kinase 2; Rho kinase 2; ROCK 2; Rock II; Rock2m; ROK alpha; ROKalpha; coiled-coil-containing protein kinase 2; KIAA0619; Rho associated, coiled coil containing protein kinase II; Rho-associated; Rho-associated protein kinase 2; Rock2; ROCK2_HUMAN. |