一抗操作步骤：
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭：这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合，从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点，以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉，缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1～2小时，特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜，以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育：在一抗孵育之前，需要参考一抗的说明书，按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后，立即加入稀释好的一抗，室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1～2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳，可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗，加入Western洗涤液，在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟，共洗涤3次。如果结果背景较高，可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤：洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合，洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液，其中的Tween20有助于去除非特异性的结合，减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定，建议清洗3-5次，每次5分钟。
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货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
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BJ012662 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
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BJ012662 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
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BJ012662 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性：
英文名称：Phospho-AKT1S1 (Thr246)
中文名称：磷酸化蛋白激酶AKT底物1抗体
别 名；PRAS40 (Phospho Thr246); PRAS40 (Phospho
T246); AKT1 substrate 1 (proline rich); PRAS40; AKT1 substrate 1; AKT1-S1; AKT1S-1;
AKT1S 1; AKT1 S1; Lobe; PRAS 40; PRAS-40; Proline rich akt substrate; 40 kDa
proline rich AKT substrate; 40 kDa proline-rich AKT substrate; AKT1 substrate
1; AKTS1_HUMAN; MGC2865; Proline rich Akt substrate 40 kDa; Proline-rich AKT1
substrate 1.
产品类型；磷酸化抗体
研究领域； 信号转导 细胞凋亡 转录调节因子 激酶和磷酸酶
抗体来源；Rabbit
克隆类型；Polyclonal
交叉反应；(predicted: Human, Mouse, Rat,
Dog, Cow, Horse, )
产品应用；WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 （石蜡切片需做抗原修复）
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量；28kDa
细胞定位；细胞浆
性 状；Liquid
浓 度；1mg/ml
免 疫 原；KLH conjugated Synthesised
phosphopeptide derived from human PRAS40 around the phosphorylation site of
Thr246: LN(p-T)SD
亚
型；IgG
纯化方法；affinity purified by Protein A
保存条件；Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项；This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍：
Subunit of mTORC1, which regulates cell growth and survival in response to nutrient and hormonal signals. mTORC1 is activated in response to growth factors or amino-acids. Growth factor-stimulated mTORC1 activation involves a AKT1-mediated phosphorylation of TSC1-TSC2, which leads to the activation of the RHEB GTPase that potently activates the protein kinase activity of mTORC1. Amino-acid-signaling to mTORC1 requires its relocalization to the lysosomes mediated by the Ragulator complex and the Rag GTPases. Activated mTORC1 up-regulates protein synthesis by phosphorylating key regulators of mRNA translation and ribosome synthesis. mTORC1 phosphorylates EIF4EBP1 and releases it from inhibiting the elongation initiation factor 4E (eiF4E). mTORC1 phosphorylates and activates S6K1 at 'Thr-389', which then promotes protein synthesis by phosphorylating PDCD4 and targeting it for degradation. Within mTORC1, AKT1S1 negatively regulates mTOR activity in a manner that is dependent on its phosphorylation state and binding to 14-3-3 proteins. Inhibits RHEB-GTP-dependent mTORC1 activation. Substrate for AKT1 phosphorylation, but can also be activated by AKT1-independent mechanisms. May also play a role in nerve growth factor-mediated neuroprotection.
抗体注意事项：
确定抗体的名字和特性：注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息，这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型：了解你的实验类型（如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS），因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型，并不意味着该抗体不适用于该实验，只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属：确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等，因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质：了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体，特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时，这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择：单克隆抗体特异性强但亲和力相对小，而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性：原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体，避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择：封闭液的选择应根据抗体说明书进行，常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点，降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项：使用干净的孵育盒子，避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白，可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品：
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大鼠内皮脂肪酶(EL)elisa检测试剂盒 |
核苷酸还原酶M2B抗体 Anti-p53R2/RRM2B |
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电压门控钾通道Kv3.2抗体 |
成骨相关转录因子抗体 Anti-Osterix |
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Kv3.2 |
磷酸化真核翻译起始因子4G抗体 |
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细胞周期蛋白N端结构域蛋白2抗体 |
phospho-eIF4G (ser1185) |
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人白细胞活化黏附因子(ALCAM)elisa分析检测试剂盒 |
锌指转录因子Slug抗体 Anti-SNAI2/SLUG |
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CNTD2 |
嗅觉受体51B5抗体 |
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组织过氧化氢酶（CATALASE）催化活性比色法定量检测试剂盒 |
OR51B5 |
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大鼠超氧化物歧化酶1,可溶性(SOD1)elisa分析检测试剂盒 |
神经细胞正五聚体1抗体 Anti-NPTX1/NP1 |
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小鼠血管紧张素原(aGT)elisa检测试剂盒 |
RAB3-GTP酶激活蛋白催化亚单位2抗体 Anti-RAB3GAP2 |
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核因子κB抑制蛋白样蛋白2抗体 |
VWCE抗体 Anti-VWCE |
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NFKBIL2 |
分子伴侣复合体TCP-1α抗体 Anti-TCP1 alpha |
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生长抑制和分化相关蛋白抗体 |
大鼠白介素28A(IL-28A)elisa分析检测试剂盒 |
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GIDRP88 |
IL-28A ELISA kit |
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微管蛋白抗体（组化用抗体）Tubulin β Anti-Tubulin-Beta |
人肌酸激酶工酶MB(CK-MB)elisa分析检测试剂盒 |
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磷酸化蛋白激酶AKT底物1抗体Rar like protein; Ras like protein family member 8C; SOCS box containing protein RAR3; rab 40C; Rab40c; RAB40C, member RAS oncogene family; RAR (RAS like GTPASE) like; RAR like; Rar-like protein; RARL; RAS like GTPase; RAS like, family 8, member C; Ras related protein Rab40C; Ras-like protein family member 8C; Ras-related protein Rab-40C; RASL8C; RB40C_HUMAN; SOCS box-containing protein RAR3. |
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