一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ009204 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ009204 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ009204 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
英文名称:HSD3B7
中文名称:滋养层细胞抗原3β7抗体
别 名;3 beta HSD VII; 3 beta hydroxy Delta(5) C27 steroid oxidoreductase; 3 beta hydroxysteroid dehydrogenase type 7; 3 beta hydroxysteroid dehydrogenase type VII; C(27) 3 beta HSD; Cca2; Cholest 5 ene 3 beta,7 alpha diol 3 beta dehydrogenase; Confluent 3Y1 cell associated 2; Hydroxy delta 5 steroid dehydrogenase, 3 beta and steroid delta isomerase 7; OTTMUSP00000018894; PFIC4; SDR11E3; BB098564; OTTMUSP00000018895; OTTMUSP00000018897; AI195443.
研究领域; 细胞生物 内皮细胞
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Rat, (predicted: Mouse, Pig, Cow, Rabbit, )
产品应用;WB=1:500-2000 ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;41kDa
细胞定位;细胞浆 细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human HSD3B7: 281-369/369
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
This gene encodes an enzyme which is involved in the initial stages of the synthesis of bile acids from cholesterol and a member of the short-chain dehydrogenase/reductase superfamily. The encoded protein is a membrane-associated endoplasmic reticulum protein which is active against 7-alpha hydrosylated sterol substrates. Mutations in this gene are associated with a congenital bile acid synthesis defect which leads to neonatal cholestasis, a form of progressive liver disease. Multiple transcript variants encoding different isoforms have been found for this gene. [provided by RefSeq, Dec 2008].
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
3’末端DNA探针位素([α32P]dATP)聚合酶标记试剂盒 |
细胞分裂周期相关蛋白4抗体 CDCA4 |
组织葡萄糖6-磷酸酶(glucose 6-phosphatase)活性比色法定量检测试剂盒 |
SPIRE1蛋白抗体 SPIRE1 |
人核因子κB受体活化剂配体(RANKL)elisa检测试剂盒 |
羟基类固醇脱氢酶11β2抗体 HSD11B2 |
大鼠花生四烯酸-12-脂加氧酶(ALOX12)elisa检测试剂盒 |
去整合素样金属蛋白酶28抗体 ADAM28 |
小鼠白介素29(IL-29)elisa检测试剂盒 |
TRIM14蛋白抗体 TRIM14 |
植物质膜蛋白提取试剂盒(2D电泳用)50T |
G蛋白偶联受体MRGX2蛋白抗体 GPCR MRGX2 |
通用型柑桔枯萎病苟养木杆菌(Xylella fastidiosa;Xf) |
HPS2蛋白抗体 HPS2 |
大鼠组蛋白H2b(histon-H2b)elisa检测试剂盒 |
增殖相关核仁抗原抗体 NOP2 |
动物组织β-半乳糖苷酶活性超敏荧光定量检测试剂盒 |
分泌凋亡相关蛋白5抗体 SFRP5 |
卷曲螺旋结构域蛋白67抗体 CCDC67 |
原钙粘蛋白7抗体 PCDH7 |
跨膜蛋白ITM2C抗体 ITM2C |
肝细胞生长因子激活物抑制剂/HGFA Inhibitor 1抗体 HAI-1 |
AF680标记的磷脂酸磷酸酶2b抗体 PAP2B, Alexa Fluor 680 conjugated |
小鼠内皮脂肪酶(EL)elisa检测试剂盒 |
AF750标记的细丝蛋白3抗体 FLNB, Alexa Fluor 750 conjugated |
大鼠白介素7(IL7)elisa检测试剂盒 |
尾侧型源转录因子1抗体 CDX1 |
石蜡切片神经组织金属锌改良蒂姆(Neo-TIMM)染色试剂盒 |
滋养层细胞抗原3β7抗体hNIFK; MKI67 FHA Domain Interacting Nucleolar Phosphoprotein; MKI67IP; NOPP34; Nucleolar phosphoprotein Nopp34; Nucleolar protein interacting with the FHA domain of pKI 67; pKi67; MK67I_HUMAN. |