一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ003610 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ003610 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ003610 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
英文名称:AP2 alpha + beta
中文名称:转录因子AP2α+β抗体
别 名;Activating enhancer binding protein 2 alpha; Activating enhancer binding protein 2 beta; AP2TF; TFAP2; TFAP2A; TFAP2B; Transcription factor AP2 alpha; Transcription factor AP2 beta; AP2A_HUMAN; AP2B_HUMAN.
研究领域; 发育生物学 转录调节因子 结合蛋白 细胞分化 表观遗传学
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, (predicted: Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Horse, Rabbit, Sheep, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;48kDa
细胞定位;细胞核
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human AP2 alpha + beta: 201-300/437
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
The AP2 proteins are normally expressed in ectodermally derived vertebrate tissues where they are necessary for normal growth and development. The factors have also been implicated in the control of cell proliferation, viral transformation, and oncogenesis. AP2 seems to play in important role in human breast cancer. AP2 alpha is the only AP2 protein required for early morphogenesis of the lens vesicle. AP2 beta appears to be required for normal face and limb development and for proper terminal differentiation and function of renal tubular epithelia.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
D-二聚体D-Dimer试剂盒 R1:18ml×1 R2:6ml×1 胶乳增强 |
磷酸核糖胺咪唑羧化酶抗体 Anti-PAICS |
麻疹(MeV)核蛋白抗体 |
PDZ结构域PDZK6蛋白抗体 Anti-PDZD6 |
Measles nucleoprotein |
罗丹明标记的兔抗小鼠IgG H&L |
源转录因子DLX3抗体 |
Rabbit Anti-Mouse IgG H&L / RBITC |
信号通路Wnt16抗体 Anti-Wnt16 |
肌浆/内质网钙ATP酶2抗体 Anti-Serca2/SERCA2 ATPase |
DLX3 |
磷酸化紧密连接蛋白6抗体 |
神经细胞粘附分子2抗体 Anti-NCAM2 |
phospho-Claudin 6 (Tyr219) |
环指蛋白160抗体 Anti-RNF160/ZNF294 |
线粒体复合物NDUFS4蛋白抗体 Anti-NDUFS4 |
突触素抗体/突触相关蛋白-1 Anti-SYAP1 |
呼吸道合胞抗体 Anti-RSV |
磷酸二酯酶6β抗体 |
调节蛋白1抗体 Anti-ZHX2 |
PDE6B |
分选连接蛋白9抗体 Anti-SNX9/SH3PX1 |
源异型盒基因HOXA5蛋白抗体 |
大鼠5'-核苷酸酶,胞膜(NT5E/CD73)elisa分析检测试剂盒 |
HOXA5 |
NT5E/CD73 ELISA kit |
磷酸化血管**素受体2抗体 Anti-Phospho-Tie2 (Ser1119) |
人干扰素活化基因205(Ifi205)elisa分析检测试剂盒 |
转录因子AP2α+β抗体Leucine-rich repeat-containing protein 59; LRC59_HUMAN; LRRC59; PRO1855. |