一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ007367 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ007367 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ007367 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
英文名称:eRF1
中文名称:真核肽链释放因子1抗体
别 名;Cl1 protein; D5S1995; ERF; eRF1; ERF1_HUMAN; ETF1; Eukaryotic peptide chain release factor subunit 1; Eukaryotic release factor 1; Eukaryotic translation termination factor 1; MGC111066; Polypeptide chain release factor 1; Protein Cl1; RF1; Sup45 (yeast omnipotent suppressor 45) homolog like 1; SUP45L1; TB3 1; TB3-1.
研究领域;细胞生物 转录调节因子 表观遗传学 G蛋白信号
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应; (predicted: Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Zebrafish, Arabidopsis Thaliana, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;49kDa
细胞定位;细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human eRF1: 341-437/437
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
This gene encodes a class-1 polypeptide chain release factor. The encoded protein plays an essential role in directing termination of mRNA translation from the termination codons UAA, UAG and UGA. This protein is a component of the SURF complex which promotes degradation of prematurely terminated mRNAs via the mechanism of nonsense-mediated mRNA decay (NMD). Alternate splicing results in coding and non-coding transcript variants. Pseudogenes of this gene are found on chromosomes 5, 7 and X. [provided by RefSeq, Jan 2012].
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
Hanks钙镁平衡盐缓冲溶液(HBSS) |
磷酸化雌受体α抗体 Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser118) |
小鼠可溶性CD80(sCD80/B7-1)elisa检测试剂盒 |
Biotin标记人CD326 (Ep-CAM)单克隆抗体 human CD326 (Ep-CAM)/Biotin |
大鼠蛋白聚糖4(PRG4)elisa检测试剂盒 |
胱抑素D/半胱氨酸蛋白酶抑制剂D抗体 Cystatin D |
细胞半胱-2(CASPASE-2)活性荧光定量检测试剂盒 |
核孔蛋白1抗体 NPAP1 |
线粒体复合物III蛋白共沉淀分析试剂盒 |
CD318抗体 CDCP1 |
人成纤维细胞生长因子4(FGF4)elisa检测试剂盒 |
肿瘤坏死因子受体2重组兔单克隆抗体 TNFR2 |
大鼠主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/AgBⅢ/H-1Ⅲ)elisa检测试剂盒 |
周围神经髓鞘蛋白2抗体 PMP2 |
小鼠白介素1β(IL1β)elisa检测试剂盒 |
山羊抗人乙肝表面抗原抗体(包被) HBsAg |
通用型鲤鱼春季病毒血症(Spring Viraemia of Carp;SVC) |
LYPD1蛋白抗体 LYPD1 |
白三烯A4水解酶抗体 LTA4H |
肉毒碱O-乙酰基转移酶 CRAT |
胞浆亮氨酸tRNA连接酶抗体 Leucyl tRNA synthetase |
NUDT16蛋白抗体 NUDT16 |
纤连蛋白2抗体 Fibulin 2 |
绵羊17羟孕酮(17-OHP)elisa检测试剂盒 |
线粒体抗病毒信号MAVS蛋白抗体 MAVS |
Human cytomegalovirus (HCMV)RFLP基因分析试剂盒 |
磷酸化GATA结合蛋白6抗体 phospho-GATA6 (Tyr271) |
小鼠成纤维细胞生长因子4(FGF4)elisa检测试剂盒 |
真核肽链释放因子1抗体P2RY8; P2RY8_HUMAN; P2Y purinoceptor 8; P2Y8; Purinergic receptor P2Y G protein coupled 8. |