一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ004156 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ004156 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ004156 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
英文名称:ApoB
中文名称:载脂蛋白B抗体
别 名;Apo B 100; Apo B; Apo B-100; Apo B-48; ApoB 100; ApoB 48; ApoB; APOB protein; APOB_HUMAN; Apolipoprotein B 100; Apolipoprotein B 48; Apolipoprotein B; Apolipoprotein B-48; FLDB.
研究领域; 心血管 细胞生物 信号转导 转录调节因子
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;(predicted: Human, Mouse, Rat, Dog, Horse, Rabbit, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;241/513kDa
细胞定位;细胞浆 分泌型蛋白
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human Apolipoprotein B: 1501-1700/4563
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Apolipoprotein B is a major protein constituent of chylomicrons (apo B-48), LDL (apo B-100) and VLDL (apo B-100). Apo B-100 functions as a recognition signal for the cellular binding and internalization of LDL particles by the apoB/E receptor.
Involvement in disease: Defects in APOB are a cause of hypobetalipoproteinemia familial type 1 (FHBL1)
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
LTB4ELISAKit |
狗elisa分析检测试剂盒 |
大鼠干细胞因子受体(SCFR)elisa分析检测试剂盒 |
200微升1厘米光径玻璃比色皿 |
SCFR ELISA kit |
28S核糖体蛋白S33抗体 |
豚鼠催产素(OT)elisa分析检测试剂盒 |
MRPS33 |
细胞CSK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
小鼠促肾上皮质释放(CRH)elisa检测试剂盒 |
OTELISAKit |
20号染色体开放阅读框177抗体 |
人P选择素(P-Selectin/CD62P)elisa检测试剂盒免费代测 |
C20orf177 |
小鼠肾损伤分子1(Kim-1)elisa检测试剂盒 |
β淀粉样蛋白前体结合蛋白B-1抗体 Anti-RIAM/APBB1 interacting protein 1 |
大鼠β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)elisa检测试剂盒 |
核蛋白p8抗体 Anti-NUPR1/p8 |
仓鼠铁蛋白(FE)elisa分析检测试剂盒 |
肿瘤抑制基因Testin抗体 Anti-Testin |
FE ELISA kit |
Sema6A抗体 Anti-Sema6A |
人端粒酶(TE)elisa分析检测试剂盒 |
辣根过氧化物酶标记的兔抗豚鼠IgG H&L |
TEELISAKit |
Rabbit Anti-Guinea Pig IgG H&L / HRP |
细胞ER BETA 蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒 |
磷酸化血小板源性生长因子受体-B抗体 |
载脂蛋白B抗体GATA-2; GATA 2; GATA Binding Protein 2; GATA-binding protein 2; Gata2; GATA2_HUMAN; MGC2306; NFE 1B; NFE1B. |