一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ014901 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ014901 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ014901 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:SISP1
中文名称:应激诱导分泌蛋白1抗体
别 名;C10orf54; VISTA_HUMAN; Platelet receptor Gi24;
stress induced secreted protein 1; UNQ730/PRO1412; V-type immunoglobulin
domain-containing suppressor of T-cell activation; Stress-induced secreted
protein-1; Sisp-1; V-set domain-containing immunoregulatory receptor; V-set
immunoregulatory receptor; VSIR; B7-H5; B7H5; DD1alpha; GI24; PD-1H; PP2135;
VISTA.
研究领域;心血管 细胞生物
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;(predicted: Human, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;31kDa
细胞定位;细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human SISP1/GI24: 21-120/311 <Extracellular>
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Platelet receptor GI24, also known as SISP1 or PP2135, is a 311 amino acid single-pass type I membrane protein that contains one Ig-like (immunoglobulin-like) domain. GI24 is thought to contribute to tumor-invasive growth in the collagen matrix and is encoded by a gene that maps to human chromosome 10q22.1. Chromosome 10 contains over 800 genes, 135 million nucleotides and comprises nearly 4.5% of the human genome. PTEN is an important tumor suppressor
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
全组织衰老特异性脂褐素靛酚原位染色试剂盒 |
抑癌基因NDRG4抗体 Anti-NDRG4 |
粘蛋白15抗体 |
促黄体诱导蛋白抗体 Anti-StAR/StARD1 |
MUC15 |
Rabbit Anti-Mouse Kappa light chain / HRP |
22号染色体开放阅读框9抗体 |
胎盘特异基因8蛋白抗体 |
蓝藻果聚糖酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒 |
辣根过氧化物酶标记的兔抗小鼠k链 |
鹿胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)elisa生化检测试剂盒 |
PLAC8 |
PDIELISAKit |
人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)elisa生化检测试剂盒 |
人蛋白质二硫键异构酶(PDI)elisa生化检测试剂盒 |
猪C肽(C-Peptide)elisa生化检测试剂盒 |
IGFBP-3 ELISA kit |
PigC-PeptideELISAKit |
兔白介素8elisa检测试剂盒 |
IDUAELISAKit |
大鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)elisa检测试剂盒 |
大鼠法尼醇X受体(FXR)elisa生化检测试剂盒 |
C22orf9 |
FXR ELISA kit |
酸敏感性钾离子通道蛋白抗体 Anti-TASK 3/KCNK9 |
山羊谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)elisa生化检测试剂盒 |
环指蛋白8抗体 Anti-RNF8 |
GSH-PXELISAkit |
应激诱导分泌蛋白1抗体bA106M7.3; DKFZp686D10123; F16B1_HUMAN; Fam160b1; Family with sequence similarity 160 member B1; Hypothetical protein LOC57700; KIAA1600; Protein FAM160B1; RP11-106M7.3. |