一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ009384 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ009384 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ009384 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Histone H4 (Acetyl K12)
中文名称:乙酰化组蛋白H4抗体
别 名;Histone H4 (Acetyl-K12); Histone H4 (Acetyl
Lys12); Acetyl-Histone H4 (Lys12); H4F2; H4FN; HIST1H4; HIST2H4; HISTH4H4;
methyl histone H4; histone H4; H4_HUMAN; Osteogenic growth peptide; OGP.
产品类型乙酰化抗体
研究领域;细胞生物 发育生物学 染色质和核信号 转录调节因子
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Mouse, Rat, (predicted: Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;11kDa
细胞定位;细胞核
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated Synthesised
acetylpeptide derived from human Histone H4 around the acetylation site of
Lys12: LG(Ac-K)GG
亚 型;IgG
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Histones are basic nuclear proteins that are responsible for the nucleosome structure of the chromosomal fiber in eukaryotes. Nucleosomes consist of approximately 146 bp of DNA wrapped around a histone octamer composed of pairs of each of the four core histones (H2A, H2B, H3, and H4). The chromatin fiber is further compacted through the interaction of a linker histone, H1, with the DNA between the nucleosomes to form higher order chromatin structures.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
铬细胞瘤患者抑基因SDHB抗体 Anti-SDHB |
增殖潜能相关蛋白抗体 Anti-RBBP6/P2P-R |
罗丹明标记的兔抗鸡IgM |
磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶39抗体 Anti-phospho-STK39(Ser325) |
Rabbit Anti-Chicken IgM / RBITC |
Col Ⅳ ELISA KIT |
真核翻译起始因子1抗体 |
人干扰素a-抗体(Anti-IFN-ab)elisa生化检测试剂盒 |
肿瘤抑素抗体 Anti-Tumstatin/COL4A3 |
大鼠Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)elisa生化检测试剂盒 |
PDZ结构域PDZK5A蛋白抗体 |
HumanAnti-interferonantibody(Anti-IFN-ab)ELISAKit |
CCDC135 |
鸡G0/G1期开关基因(G0S2)elisa检测试剂盒 |
卷曲螺旋结构域蛋白135抗体 |
小鼠胺氧化酶(含黄素)A(MAOA)elisa检测试剂盒 |
PDZD5A |
仓鼠甲状腺结合球蛋白(TBG)elisa检测试剂盒 |
前列腺素EP1受体抗体 Anti-PTGER1/EP1 |
载玻片细胞TUBULIN蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
前列腺癌激活蛋白抗体 Anti-PDZK3 |
甲状腺受体相关蛋白复合物230样蛋白抗体 |
eIF1 |
MED12L |
锌指蛋白3/环指蛋白3抗体 Anti-ZNRF3 |
1号染色体开放阅读框109抗体 |
神经营养因子3抗体 Anti-NT-3 |
C1orf109 |
乙酰化组蛋白H4抗体C8orf36; E3 SUMO-protein ligase NSE2; hMMS21; hNSE2; methyl methanesulfonate sensitivity gene 21; MMS21; MMS21 homolog; non-SMC element 2; Non-SMC element 2 homolog; Non-structural maintenance of chromosomes element 2 homolog; NSE2_HUMAN; NSMCE2. |