一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ009148 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ009148 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ009148 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:HFE
中文名称:遗传性血色病蛋白相关蛋白1抗体
别 名;dJ221C16.10.1; Hemochromatosis;
Hemochromatosis protein; Hereditary hemochromatosis protein; Hereditary
hemochromatosis protein HLA H; HFE 1; HFE; HFE_HUMAN; HFE1; HH; High Fe; HLA H;
HLA-H; HLAH; MGC:150812; MGC10379; MGC103790; MHC class I like protein HFE;
MVCD7; TFQTL2.
研究领域; 心血管 细胞生物 神经生物学 信号转导 糖尿病 新陈代谢
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应; Human, (predicted: Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse,
Sheep, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000
IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1μg/Test
ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;38kDa
细胞定位;细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from Human HFE/Hemochromatosis: 262-348/348
<Extracellular>
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
The features of hemochromatosis include cirrhosis of the liver, diabetes, hypermelanotic pigmentation of the skin, and heart failure. Since hemochromatosis is a relatively easily treated disorder if diagnosed, this is a form of preventable cancer. The HFE protein, which is defective in hereditary hemo-chromatosis, normally is expressed in crypt enterocytes of the duodenum where it has a unique, predominantly intracellular localization.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
人沙眼衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)elisa检测试剂盒 |
磷脂爬行酶3抗体 Anti-PLSCR3 |
蛋白激酶受体相关1β抗体 |
丝氨酸蛋白酶抑制剂A11抗体 Anti-SERPIN A11 |
PKA regulatory subunit I beta |
Goat Anti-Chicken IgG H&L / PE |
卷曲螺旋结构域蛋白89抗体 |
棉铃虫紫外波长敏感的视蛋白抗体 |
小鼠糖原磷酸化酶工酶BB(GP-BB)elisa检测试剂盒 |
PE标记的羊抗鸡IgG H&L |
球蛋白超家族成员3抗体 |
Ultraviolet wavelength-sensitive opsin |
ALOXE3 |
犬半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)elisa生化检测试剂盒 |
过氧化氢异构酶ALOXE3抗体 |
小鼠基质金属蛋白酶13(MMP-13)elisa生化检测试剂盒 |
IGSF3 |
MMP-13ELISAkit |
大鼠接触蛋白4(CNTN4)elisa检测试剂盒 |
Cys-C ELISA Kit |
细胞磷酸二酯酶3(PDE3)活性荧光定量检测试剂盒 |
猴子白介素8(IL-8/CXCL8)elisa生化检测试剂盒 |
CCDC89 |
IL-8 ELISA Kit |
甲状腺过氧化物酶抗体 Anti-Thyroid peroxidase |
人肺炎衣原体抗原(Cpn)elisa生化检测试剂盒 |
PRPF4蛋白抗体 Anti-PRPF4 |
CpnELISAKit |
遗传性血色病蛋白相关蛋白1抗体D19L2_HUMAN; Probable C-mannosyltransferase DPY19L2; dpy 19 like 2; dpy 19 like 2 (C. elegans); Dpy 19 like protein 2; Dpy-19-like protein 2; dpy19; FLJ32949; FLJ36166; Protein dpy 19 homolog 2; Protein dpy-19 homolog 2. |