一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ003738 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ003738 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ003738 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:AMY2A
中文名称:胰腺α淀粉酶抗体
别 名;amylase, salivary, B; 1 4 alpha D glucan
glucanohydrolase; 1; 1,4 alpha D glucan glucanohydrolase 2B; 1,4-alpha-D-glucan
glucanohydrolase 1; 4-alpha-D-glucan glucanohydrolase 1; Alpha amylase 2B;
Alpha amylase; Alpha amylase carcinoid; Alpha-amylase 1; alpha-amylase found in
the pancreas; AMY1; AMY1_HUMAN; AMY1C; AMY2; AMY2B; AMY3; Amylase alpha 2A;
pancreatic; amylase, alpha 1A (salivary); Amylase, alpha 1B (salivary);
amylase, alpha 1C (salivary); Amylase, alpha 2A (pancreatic); amylase, alpha 2B
(pancreatic); amylase, pancreatic , B; amylase, pancreatic, alpha-2A; amylase,
salivary, alpha-1A; amylase, salivary, alpha-1B; amylase, salivary, alpha-1C;
amylase, salivary, C; carcinoid alpha-amylase; e amylase, alpha 1B (salivary);
Found in the pancreas; glycogenase; HXA; PA; pancreatic alpha-amylase;
pancreatic amylase 2A; pancreatic amylase alpha 2A; Salivary alpha-amylase;
salivary amylase alpha 1A; salivary amylase alpha 1B; salivary amylase alpha
1C.
研究领域; 心血管 细胞生物
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;(predicted: Human, Mouse, Rat,
Dog, Pig, Rabbit, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;58kDa
细胞定位;分泌型蛋白
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human Pancreatic Amylase: 421-511/511
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Amylases are secreted proteins that hydrolyze 1,4-alpha-glucoside bonds in oligosaccharides and polysaccharides, and thus catalyze the first step in digestion of dietary starch and glycogen. The human genome has a cluster of several amylase genes that are expressed at high levels in either salivary gland or pancreas. This gene encodes an amylase isoenzyme produced by the pancreas. [provided by RefSeq, Jul 2008].
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
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核受体共激活因子7抗体 |
细胞因子信号传导抑制蛋白3抗体 Anti-SOCS3 |
NCOA7 |
Rabbit Anti-Monkey IgM / PE-Cy5.5 |
5号染色体开放阅读框60抗体 |
轮状病毒 (RVA) VP4抗体 |
人5羟色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)抗体(IgG)elisa检测试剂盒 |
PE-Cy5.5标记的兔抗猴IgM |
鱼肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa生化检测试剂盒 |
Rotavirus A VP4 |
ERELISAKit |
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人雌二醇受体(ER)elisa生化检测试剂盒 |
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TNF-α ELISA KIT |
EPOELISAKit |
组织样品组织L(CATHEPSIN L)活性荧光定量检测试剂盒 |
HumanmyelinproteinzeroantibodyIgGELISAKit |
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大鼠层连蛋白/板层素(LN)elisa生化检测试剂盒 |
C5orf60 |
LN ELISA kit |
转录因子THOC2抗体 Anti-THOC2 |
人甲基化DNA[蛋白]半胱氨酸S甲基转移酶elisa生化检测试剂盒 |
蛋白甘露糖基转移酶1抗体 Anti-POMT1 |
Humanmethylated-DNA--protein-cysteineS-methyltransferaseELISAKit |
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