一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ006696 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ006696 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ006696 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Carboxypeptidase B1
中文名称:胰羧肽酶B1抗体
别 名;Carboxypeptidase B1; CarboxypeptidaseB;
CarboxypeptidaseB1; CP B1; CPB 1; CPB; CPB1; DKFZp779K1333; Pancreas specific
protein; Pancreatic carboxypeptidase B1; PASP; PCPB; Procarboxypeptidase B
pancreatic; CBPB1_HUMAN.
研究领域;细胞生物 信号转导
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Mouse, (predicted: Human, Rat, Dog, Pig, Horse,
Rabbit, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;47kDa
细胞定位;分泌型蛋白
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human Carboxypeptidase B1: 251-350/417
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Carboxypeptidase catalyzes the hydrolysis of the basic amino acids lysine, arginine and ornithine from the C terminal position in polypeptides. It occurs as a zymogen in the pancreas in most vertebrates.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
纯化线粒体蛋白质浓度定量测定试剂盒 |
脑红蛋白/神经血红蛋白/神经球蛋白抗体 Anti-NGB/neuroglobin |
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MUC1 |
Rabbit Anti-Rat IgM / PE-Cy5.5 |
22号染色体开放阅读框45抗体 |
胎盘蛋白6抗体 |
体外非细胞系统细胞色素P450亚酶2A6(COUMARIN)活性 |
PE-Cy5.5标记的兔抗大鼠IgM |
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PL6 |
HumanDFIgGELISAkit |
人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)elisa生化检测试剂盒 |
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四、细胞凋亡整体解决方案——Apoptosis |
αNAGELISAKit |
大鼠磷酸化糖原合成酶激酶3(pGSK-3)elisa检测试剂盒 |
大鼠泛素激活酶(E1/UBAE)elisa生化检测试剂盒 |
C22orf45 |
E1/UBAE ELISA Kit |
色氨酸相关蛋白3抗体 Anti-TRPC3 |
山羊骨保护素(OPG)elisa生化检测试剂盒 |
中间丝相关蛋白抗体 Anti-Repetin |
OPGELISAKIT |
胰羧肽酶B1抗体DNA topoisomeraseⅡalpha; TOPO II; DNA topoisomerase 2-alpha; DNA topoisomerase II, alpha isozyme; TOP2; TP2A; DNA topoisomerase II 170 kD; DNA topoisomerase II alpha isozyme; DNA Topoisomerase2; TOP 2A; TopII alpha; Topo II alpha; Topoisomerase DNA II alpha 170kDa; Topoisomerase II alpha 170 kDa; TOP2A_HUMAN; Topo IIα; Topo-IIα; Topoisomerase II-α. |