一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ004092 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ004092 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ004092 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:AKD1
中文名称:腺苷酸激酶结构域蛋白1抗体
别 名;adenylate kinase domain containing 1;
adenylate kinase domain containing 2; Adenylate kinase domain-containing
protein 1; Adenylate kinase domain-containing protein 2; AKD1; AKD1_HUMAN; AKD2
; C6orf224; chromosome 6 open reading frame 199; chromosome 6 open reading frame
224 Gm234; Gm7127; RP1-70A9.
研究领域; 细胞生物 神经生物学
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Mouse, (predicted: Human, Rat, Dog, Cow, Horse,
Rabbit, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000
IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;221kDa
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human AKD1: 1331-1430/1911
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
AKD1 is a 1,911 amino acid coiled-coil protein belonging to the adenylate kinase family. AKD1 exists as six alternatively spliced isoforms and is encoded by a gene that maps to human chromosome 6q21. Chromosome 6 makes up nearly 6% of the human genome and contains 170 million base pairs, which encode 1,200 genes. Deletion of a portion of the q arm of chromosome 6 is associated with early onset intestinal cancer, suggesting the presence of a cancer susceptibility locus. A bipolar disorder susceptibility locus is also linked to the q arm of chromosome 6.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
锌指蛋白924抗体 Anti-ZBTB41/ZNF924 |
肿瘤抑制基因p63α抗体 Anti-P63 protein/P51A |
乳酸菌S-层蛋白抗体 |
磷酸化马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体 Anti-Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser1254) |
S-layer protein |
Rabbit Anti-Rat IgM whole serum |
酰硫酯酶蛋白2抗体 |
甘露糖脱水酶GMDS抗体 |
突触结合蛋白5抗体 Anti-Synaptotagmin 5 |
兔抗大鼠IgM抗血清 |
LEPREL1蛋白抗体 |
GMDS |
CPXM |
鸡HSP90抗体(IgM)elisa生化检测试剂盒 |
羧肽酶X(M14家族1)抗体 |
小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)elisa生化检测试剂盒 |
LEPREL1 |
βManaseELISAKit |
Runx3抗体 Anti-Runx3 |
Chicken Hsp90 antibody IgM ELISA Kit |
核因子活化T细胞胞浆蛋白3抗体 Anti-NFAT4 |
鱼11-酮类固醇elisa生化检测试剂盒 |
LYPLA2 |
Fish 11-Keto Steroid ELISA Kit |
突触泡蛋白2C抗体 Anti-SV2C |
人臂板蛋白3A(Sema 3A)elisa生化检测试剂盒 |
磷酸化酪氨酸磷酸酶α抗体 Anti-phospho-PTPRA(Tyr798) |
HumanSema3AELISAKit |
腺苷酸激酶结构域蛋白1抗体Ldlbc; CDG2Gv Component of oligomeric golgi complex 1; Conserved oligomeric Golgi complex protein 1; Low density lipoprotein receptor defect B complementing; COG1_HUMAN. |