一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ013404 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ013404 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ013404 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:SCNN1B
中文名称:上皮钠通道β抗体
别 名;Amiloride sensitive sodium channel subunit
beta; Beta NaCH; ENaC beta; ENaCB; Epithelial Na(+) channel subunit beta;
Epithelial Na+ channel beta subunit; Epithelial Na+ channel subunit beta;
Epithelial sodium channel beta 2 subunit; Epithelial sodium channel beta 3
subunit; Nonvoltage gated sodium channel 1 beta subunit; SCNNB_HUMAN;
Nonvoltage gated sodium channel 1 subunit beta; SCNEB; SCNN 1B; Sodium channel
nonvoltage gated 1 beta (Liddle syndrome); Sodium channel nonvoltage gated 1
beta. βENaC
研究领域; 神经生物学 信号转导 细胞膜受体 新陈代谢
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, (predicted: Mouse, Rat, Pig, Horse, Rabbit, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;73kDa
检测分子量95-100/65-75 kDa
细胞定位;细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human SCNN1B: 401-500/685 <Extracellular>
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
产品介绍:
SCNN1B is a subunit of the epithelial sodium channel, ENaC. ENac has high sodium selectivity, low conductance, and amiloride sensitivity. The functional channel of ENaC is composed of at least 3 subunits, alpha (SCNN1A), beta (SCNN1B), and gamma (SCNN1G). The 3 subunits show sequence similarities to one another, indicating descent from a common ancestral gene. Each encodes a protein containing 2 transmembrane domains, with intracellular amino and carboxyl termini.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
Hanks平衡盐缓冲溶液(HBSS) |
磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶1C抗体 Anti-phospho-PTPN6(Tyr564) |
蛋白酶调解因子7抗体 |
染色体结构维持蛋白6抗体 Anti-SMC6 |
PSMD7 |
Goat Anti-Mouse IgG H&L / AP |
周期素依赖性激酶样5抗体 |
锌指蛋白923抗体 |
血液乙酰转移酶(LCAT)活性荧光定量检测试剂盒 |
碱性磷酸酶(AP)标记的羊抗小鼠IgG H&L |
整合素α9抗体 |
ZBTB40 |
Annexin A9 |
牛叶酸(FA)elisa生化检测试剂盒 |
膜粘连蛋白9抗体 |
小鼠骨胶原交联(Cr)elisa生化检测试剂盒 |
Integrin alpha 9 |
CrELISAKit |
人组织因子途径抑制物(TFPI)elisa检测试剂盒 |
FA ELISA Kit |
大鼠抗单核细胞抗体(AMA)elisa检测试剂盒 |
仓鼠心肌肌钙蛋白I(TNNI3)elisa生化检测试剂盒 |
CDKL5 |
TNNI3 ELISA kit |
泛素蛋白连接酶E2I抗体 Anti-SUMO-1/UBC9 |
人端粒重复序列结合因子1(TERF1)elisa生化检测试剂盒 |
原钙粘蛋白γC3抗体 Anti-PCDHGC3/PCDH2 |
HumanTERF1ELISAkit |
上皮钠通道β抗体CD3 epsilon; CD3e antigen epsilon polypeptide (TiT3 complex); CD3E antigen epsilon polypeptide; CD3E antigen, epsilon subunit; CD3e molecule epsilon; CD3e molecule, epsilon (CD3 TCR complex); CD3e molecule, epsilon (CD3-TCR complex); CD3E_HUMAN; IMD18; T cell antigen receptor complex epsilon subunit of T3; T cell surface antigen T3/Leu 4 epsilon chain; T cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain; T-cell surface antigen T3/Leu-4 epsilon chain; T-cell surface glycoprotein CD3 epsilon chain; T3E; TCRE. |