一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ012254 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ012254 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ012254 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Puratrophin 1
中文名称:浦肯野细胞萎缩相关蛋白1抗体
别 名;ARHGEF44; PH domain-containing family G member
4; PKHG4_HUMAN; Pleckstrin homology domain containing family G (with RhoGef
domain) member 4; member 4; Pleckstrin homology domain-containing family G
member 4; PLEKHG 4; PLEKHG4; PRTPHN 1; PRTPHN1; Puratrophin 1; Puratrophin-1;
Puratrophin1; Purkinje cell atrophy associated protein 1; Purkinje cell atrophy-associated
protein 1; SCA 4; SCA4.
研究领域;细胞生物 神经生物学
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Mouse, Rat, (predicted: Human, Dog, Cow, Horse, Sheep, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;131kDa
细胞定位;细胞核 细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human Puratrophin 1/PLEKHG4: 945-1045/1191
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
The protein encoded by this gene contains multiple domains suggestive of a role in intracellular signaling and cytoskeleton dynamics at the Golgi apparatus. Mutations in this gene are associated with spinocerebellar ataxia 16q22-linked. Several alternatively spliced transcript variants, differing only in the 5' UTR, or encoding a different isoform, have been found for this gene. [provided by RefSeq, Jul 2008]
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
强化染色试剂盒 |
磷酸酯酶3蛋白抗体 Anti-PRL3/PRL-R |
OSGIN2蛋白抗体 |
丝氨酸/精氨酸相关核基质蛋白1抗体 Anti-SRRM1 |
OSGIN2 |
Mouse Anti-Rat IgG H&L / HRP |
HEAT重复内含蛋白7A蛋白抗体 |
FbxL7蛋白抗体 |
β-葡萄糖苷酶(β-GC)/纤维二糖水解酶测试盒 |
辣根过氧化物酶标记的小鼠抗大鼠IgG H&L |
三聚氰胺ELISA快速检测试剂盒 |
FbxL7 |
HumanIL-2antibodyELISAKit |
人B细胞活化因子受体(BAFF-R)elisa生化检测试剂盒 |
人白介素2(IL-2)抗体elisa生化检测试剂盒 |
小鼠磷酸化蛋白激酶B(P-PKB)elisa生化检测试剂盒 |
Melamine ELISA Kit |
P-PKBELISAKit |
小鼠基质金属蛋白酶3(MMP-3)elisa检测试剂盒 |
HumanBAFF-RELISAKit |
猫雌二醇(E2)elisa生化检测试剂盒 |
大鼠N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体亚单位NR2 elisa生化检测试剂盒 |
HEATR7A |
Rat N-Methyl-D-Aspartate (NMDA) Receptor 2 (NR2) ELISA Kit |
微管蛋白γ/Tubulin γ抗体 Anti-gamma tubulin (Centrosome Marker ) |
人骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)elisa生化检测试剂盒 |
肝再生磷酸酯酶2抗体 Anti-PRL2/PTP4A2 |
OT/BGPELISAkit |
浦肯野细胞萎缩相关蛋白1抗体BOLA 1; BOLA-1; BolA homolog 1; BolA like 1; BolA like protein 1; BolA-like protein 1; Bola1; BOLA1_HUMAN; CGI 143; hBolA; MGC75015; RP11 196G18.18. |