一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ008749 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ008749 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ008749 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase
中文名称:葡萄糖-6磷酸脱氢酶抗体
别 名;G6PD; G6PD_HUMAN; G6PD1; G6pdx; Glucose 6
phosphate 1 dehydrogenase; Glucose-6-phosphate 1-dehydrogenase; MET19; POS10;
Zwf1p. 6磷酸葡萄糖脱氢酶;
研究领域;心血管 细胞生物 信号转导 糖尿病 新陈代谢
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应; Mouse, (predicted: Human, Rat, Cow, Horse, Rabbit,
Sheep, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;57kDa
细胞定位;细胞浆 细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase: 351-450/515
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Defects in G6PD are the cause of chronic non-spherocytic hemolytic anemia (CNSHA) . Deficiency of G6PD is associated with hemolytic anemia in two different situations. First, in areas in which malaria has been endemic, G6PD-deficiency alleles have reached high frequencies (1% to 50%) and deficient individuals, though essentially asymptomatic in the steady state, have a high risk of acute hemolytic attacks. Secondly, sporadic cases of G6PD deficiency occur at a very low frequencies, and they usually present a more severe phenotype. Several types of CNSHA are recognized. Class-I variants are associated with severe NSHA; class-II have an activity <10% of normal; class-III have an activity of 10% to 60% of normal; class-IV have near normal activity.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
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神经特异性蛋白抗体 Anti-Reticulon 1 |
胶原蛋白6α2抗体 |
雌反应锌指蛋白抗体 Anti-TRIM25 |
Colla VI alpha 2 |
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PSD95结合蛋白1抗体 |
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NAT14 |
组织基质金属抑制剂1(TIMP-1)活性荧光定量检测试剂盒 |
增殖细胞核抗原抗体 Anti-PCNA-Proliferation Marker |
小鼠内(ET)elisa检测试剂盒 |
精子尾部结构蛋白抗体 Anti-ODF2/Cenexin1 |
KIAA1211蛋白抗体 |
DLGAP1 |
KIAA1211 |
囊泡对接蛋白p115抗体 Anti-Vesicle docking protein p115 |
ASTE1蛋白抗体 |
NALP12抗体 Anti-NALP12 |
ASTE1 |
葡萄糖-6磷酸脱氢酶抗体Apoptosis facilitator; Bcl 2 like 13; Bcl 2 like 13 protein; BCL2 like 13 apoptosis facilitator; BCL2 like 13; Bcl2 like 13 protein; MIL 1; MIL1; MIL1 protein; Protein Mil1; B2L13_HUMAN. |