一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ012516 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ012516 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ012516 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:PAX3
中文名称:配对盒基因3抗体
别 名;CDHS; HUP 2; HUP2; MGC120381; MGC120382;
MGC120383; MGC120384; MGC134778; paired box homeotic gene 3; Paired box protein
Pax 3; Paired box protein Pax3; paired domain gene 3; paired domain gene HuP2;
PAX 3; PAX3/FKHR fusion gene; Waardenburg syndrome 1; WS 1; WS1.
研究领域; 发育生物学 信号转导 干细胞 转录调节因子
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Mouse, Rat,
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;53kDa
细胞定位;细胞核
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human PAX3: 151-250/479
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
This protein is a
member of the paired box (PAX) family of transcription factors. Members of the
PAX family typically contain a paired box domain and a paired-type homeodomain.
These proteins play critical roles during fetal development. Mutations in
paired box gene 3 are associated with Waardenburg syndrome,
craniofacial-deafness-hand syndrome, and alveolar rhabdomyosarcoma. The
translocation t(2;13)(q35;q14), which represents a fusion between PAX3 and the
forkhead gene, is a frequent finding in alveolar rhabdomyosarcoma. Alternative
splicing results in transcripts encoding isoforms with different C-termini.
Transcription factor that may regulate cell proliferation, migration and apoptosis. Involved in neural development and myogenesis.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
食物氨一步法定量检测试剂盒 |
NDUFS2抗体 Anti-NDUFS2 |
EGR1结合蛋白1抗体 |
垂体肿瘤转化基因抗体 Anti-Securin/PTTG |
NAB1 |
Rabbit Anti-Bovine IgG H&L / PE-Cy5 |
3号染色体开放阅读框70抗体 |
受体活性修饰蛋白2抗体 |
大鼠基质金属蛋白酶3(MMP-3)elisa检测试剂盒 |
PE-CY5标记的兔抗牛IgG H&L |
貂环磷酸鸟苷(cGMP)elisa生化检测试剂盒 |
RAMP2 |
HumanBand3proteinELISAkit |
人SH2携带蛋白(SHC/SLP-76)elisa生化检测试剂盒 |
人带3蛋白(Band3)elisa生化检测试剂盒 |
小鼠糖原合成酶激酶(GSK)elisa生化检测试剂盒 |
cGMP ELISA Kit |
GSKELISAKit |
猪补体片断5a(C5a)elisa生化检测试剂盒 |
HumanSHC/SLP-76ELISAKit |
人集蛋白亚家族成员11(COLEC11)elisa生化检测试剂盒 |
大鼠促胰液素/胰泌素(Sct)elisa生化检测试剂盒 |
C3orf70 |
Sct ELISA kit |
跨膜蛋白2样蛋白抗体 Anti-TMEM2L/KIAA1199 |
人结蛋白(Des)elisa生化检测试剂盒 |
磷酸化血小板源性生长因子受体B抗体 Anti-Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr716) |
HumandesminELISAKit |
配对盒基因3抗体H3N2, matrix protein 2 [Influenza A virus (A/(A/Thailand/CU23/2006(H3N2))]; M2_I72A2; Matrix protein 2; Proton channel protein M2; M; [Influenza A virus (A/Udorn/307/1972(H3N2))]. |