一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ008825 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ008825 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ008825 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:GTPBP9
中文名称:鸟嘌呤核苷酸结合蛋白9抗体
别 名;DNA damage-regulated overexpressed in cancer
45 protein; DOC45; GBP45; GTP-binding protein 9 (putative); GTP-binding protein
9; GTP-binding protein PTD004; homologous yeast-44.2 protein; Obg like ATPase
1; Obg-like ATPase 1; OLA1; OLA1_HUMAN; PTD004.
研究领域;细胞生物 G蛋白信号
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应; Human, Mouse, (predicted: Rat, Dog, Cow, Sheep, Fruit Fly,
)
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1ug/Test
ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;45kDa
细胞定位;细胞核 细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human GTPBP9: 151-250/396
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
GTP-binding protein 9 is a 396 amino acid protein that belongs to the Obg-related GTPase family under the translation factors (TRAFAC) class. Originally thought to only have GTPase activity, Obg-related GTPase family members have been shown to also have ATPase activity. In Homo sapians, GTPBP9 exhibits a preference for binding ATP over GTP, with GTP binding occuring only at high nucleotide concentration. One cause for ATP affinity and GTP discrimination is thought to be a substitution of glutamine for a hydrophobic amino acid in Obg-related family members;
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
亚硝酸还原酶(NiR)测试盒 |
类固醇受体激活蛋白3抗体 Anti-NCOA3/KAT13B/AIB1/SRC-3 |
肌微管素相关蛋白3抗体 |
肺表面活性蛋白D抗体 Anti-SP-D/PSPD |
MTMR3 |
Rabbit Anti-Human IgM / Cy3 |
FAM123C蛋白抗体 |
ERGIC2蛋白抗体 |
细胞脯羟化酶(prolil hydroxylase)活性比色法定量检测试剂盒 |
Cy3标记的兔抗人IgM |
骆驼β内啡肽(β-EP)elisa生化检测试剂盒 |
ERGIC2 |
HumanLRP-4ELISAKit |
人α-辅肌动蛋白4(ACTN-4)elisa生化检测试剂盒 |
人低密度脂蛋白受体相关蛋白4(LRP-4)elisa生化检测试剂盒 |
猪S100B蛋白(S-100B)elisa生化检测试剂盒 |
β-EP ELISA Kit |
S-100BELISAKit |
人高分子量脂联素(HMW Adiponectin)elisa生化检测试剂盒 |
HumanACTN-4ELISAKit |
大鼠归巢关联细胞黏附分子(HCAM)elisa检测试剂盒 |
大鼠肥大细胞类胰凝乳蛋白酶elisa生化检测试剂盒 |
FAM123C |
Rat Mast Cell Chymase ELISA Kit |
金属蛋白酶组织抑制因子-1抗体(C端) Anti-TIMP-1(CT) |
山羊黄体**素(LH)elisa生化检测试剂盒 |
核酮糖1,5二磷酸羧化酶抗体 Anti-RUBISCO |
LHELISAKIT |
鸟嘌呤核苷酸结合蛋白9抗体FAM14A; Family with sequence similarity 14 member A; Interferon alpha inducible protein 27 like 2; Interferon alpha inducible protein 27 like protein 2; Interferon stimulated gene 12b protein; I27L2_HUMAN; ISG12(b) protein; ISG12B; MGC44913; pIFI27 like protein; Protein TLH29; TLH29; TLH29 protein. |