一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ007484 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ007484 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ007484 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:EMAP2
中文名称:内皮单核细胞激活肽2抗体
别 名;AIMP 1; Aimp1; AIMP1/p43; AIMP1_HUMAN ;
Aminoacyl tRNA synthetase complex-interacting multifunctional protein 1; ARS
interacting multifunctional protein 1; ARS-interacting multifunctional protein
1; EMAP 2; EMAP-2; EMAP-II; EMAP II; EMAP2; EMAPII; Endothelial monocyte
activating polypeptide 2; Endothelial Monocyte Activating Polypeptide;
Endothelial monocyte-activating polypeptide 2; Endothelial monocyte-activating
polypeptide II; Multisynthase complex auxiliary component p43; Multisynthetase
complex auxiliary component p43; p43 antibody Scye 1; Scye1; Small Inducible
Cytokine Subfamily E Member 1; Small inducible cytokine subfamily E, member 1
(endothelial monocyte-activating).
研究领域; 心血管 细胞生物 染色质和核信号
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, (predicted: Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow,
Rabbit, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;34kDa
细胞定位;细胞核 细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human EMAP2: 201-300/312
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Non-catalytic component of the multisynthase complex. Stimulates the catalytic activity of cytoplasmic arginyl-tRNA synthase. Binds tRNA. Possesses inflammatory cytokine activity. Negatively regulates TGF-beta signaling through stabilization of SMURF2 by binding to SMURF2 and inhibiting its SMAD7-mediated degradation. Involved in glucose homeostasis through induction of glucagon secretion at low glucose levels. Promotes dermal fibroblast proliferation and wound repair. Regulates KDELR1-mediated retention of HSP90B1/gp96 in the endoplasmic reticulum.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
磷酸化信号转导和转录激活因子4抗体 Anti-Phospho-Stat4 (Tyr693) |
磷酸化Rho相关蛋白激酶2抗体 Anti-phospho-ROCK2(Tyr256) |
ZDHHC19蛋白抗体 |
谷氨酰胺转胺酶1抗体 Anti-Transglutaminase |
ZDHHC19 |
ABCB1 ELISA kit |
肾连蛋白抗体 |
山羊促性腺释放(GnRH)elisa生化检测试剂盒 |
肿瘤蛋白P53诱导蛋白11抗体 Anti-TP53I11 |
大鼠多药耐药蛋白1(ABCB1)elisa生化检测试剂盒 |
粘脂蛋白2抗体 |
GnRHELISAKit |
FAM174B |
石蜡切片肥大细胞(MAST CELL)天青A(Azure A)(特异) |
FAM174B蛋白抗体 |
特定微型RNA(miRNA)扩增引物合成 |
mucolipin 2 |
小鼠胱天蛋白酶7(CASP7)elisa检测试剂盒 |
原癌基因相关蛋白RAP2B抗体 Anti-RAP2B |
动物组织/细胞基因组提取试剂盒 50次 |
核呼吸因子-1抗体 Anti-NRF-1 |
角蛋白相关蛋白20.4抗体 |
Nephronectin |
KAP20.4 |
突触泡蛋白2A抗体 Anti-SV2A |
卷曲螺旋结构域蛋白127抗体 |
轴索过度生长抑制因子A+B抗体 Nogo-B/A Anti-Nogo A+B |
CCDC127 |
内皮单核细胞激活肽2抗体Bcl10 interacting protein with CARD protein; BinCARD; Chromosome 9 open reading frame 89; BINCA_HUMAN. |