一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ008896 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ008896 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ008896 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:GPBB
中文名称:脑糖原磷酸化酶抗体
别 名;Brain glycogen phosphorylase; Glycogen
phosphorylase B; Glycogen phosphorylase brain form; Glycogen Phosphorylase
Isoenzyme BB; Glycogen phosphorylase, brain form; MGC9213; Phosphorylase
glycogen brain; PYGB; PYGB_HUMAN.
研究领域; 心血管 信号转导
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;(predicted: Human, Mouse, Rat,
Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000
IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;97kDa
细胞定位;细胞浆 细胞膜 细胞外基质 分泌型蛋白
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human GPBB/PYGB: 301-400/843
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Glycolysis is an evolutionarily conserved series of ten chemical reactions that utilizes eleven enzymes to concomitantly generate pyruvate and ATP from glucose. Phospho-fructose kinase-2/fructose 2,6-bisphosphatase (PFK-2) stimulates the synthesis and degradation of fructose 2,6-bisphosphate. Glycogen phosphorylase (also known as GP) is an allosteric enzyme important in carbohydrate metabolism. Its activity is regulated through either noncovalent
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
大鼠胆囊收缩素八肽(CCK-8)elisa检测试剂盒 |
原钙粘蛋白γC3抗体 Anti-PCDHGC3/PCDH2 |
环指蛋白41抗体 |
泛素蛋白连接酶E2I抗体 Anti-SUMO-1/UBC9 |
RNF41 |
Rabbit Anti-Mouse IgM / Gold |
KLF15蛋白抗体 |
甘丙肽受体3抗体 |
牛生长(GH)elisa生化检测试剂盒 |
胶体金标记的兔抗小鼠IgM |
钙激活钾通道蛋白β4抗体 |
GALR3 |
CDON |
绵羊γ干扰素(IFN-γ)elisa生化检测试剂盒 |
细胞粘附分子相关蛋白/癌基因下调蛋白抗体 |
小鼠催乳素(PRL)elisa生化检测试剂盒 |
KCNMB4 |
PRL/LTHELISAKit |
血液过氧化氢(HYDROGEN PEROXIDE)活性荧光定量检测试剂盒 |
IFN-γ ELISA Kit |
小鼠巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)elisa检测试剂盒 |
鸽子白蛋白(Albumin)elisa生化检测试剂盒 |
KLF15 |
Pigeon Albumin ELISA Kit |
染色体结构维持蛋白6抗体 Anti-SMC6 |
人单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体IgM(HSVⅡ-Ab)elisa生化检测试剂盒 |
磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶1C抗体 Anti-phospho-PTPN6(Tyr564) |
HSVⅡ-AbELISAKit |
脑糖原磷酸化酶抗体Chromosome 9 open reading frame 62; MGC35463; Putative uncharacterized protein C9orf62;CI062_HUMAN. |