一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ007185 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ007185 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ007185 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:DNER
中文名称:脑表皮生长因子跨膜蛋白DNER抗体
别 名;Brain EGF repeat-containing transmembrane
protein; Bret; Delta and Notch-like epidermal growth factor-related receptor;
Delta/notch-like EGF-related receptor; Dner; DNER_HUMAN; PRO299; Transmembrane
protein Bet; UNQ26.
研究领域;神经生物学 信号转导 干细胞 细胞表面分子
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;(predicted: Human, Mouse, Rat,
Dog, Cow, Sheep, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000
IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;75kDa
细胞定位;细胞浆 细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human DNER: 185-300/737 <Extracellular>
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Activator of the
NOTCH1 pathway. May mediate neuron-glia interaction during astrocytogenesis.
Activator of the NOTCH1 pathway. May mediate neuron-glia interaction during astrocytogenesis.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
信号通路Wnt4抗体 Anti-WNT4 |
果胶酶抑制蛋白18抗体 Anti-Pectinesterase inhibitor 18 |
跨膜TMIGD1蛋白抗体 |
脂多糖相关反应蛋白5/γ-taxilin抗体 Anti-Gamma-taxilin/LSR5 |
TMIGD1 |
Human IgG / AF647 |
周期素M3抗体 |
A型流感病毒H9N1神经氨酸酶型抗体 |
转录因子SP6抗体 Anti-SP6 |
AF647标记的人IgG |
单羧酸转运14抗体 |
H9N1 Neuraminidase |
C1GALT1C1 |
大鼠肌红蛋白(MYO/MB)elisa生化检测试剂盒 |
半乳糖基转移酶2抗体 |
小鼠17羟孕酮(17-OHP)elisa生化检测试剂盒 |
MCT14 |
17-OHPELISAKit |
视网膜S抗原抗体 Anti-Retinal S antigen/S-antigen |
MYO/MB ELISA Kit |
神经损伤诱导蛋白2抗体 Anti-Ninjurin 2 |
羟基类固醇(17β)脱氢酶4/17β-HSD4抗体 |
Cyclin M3 |
HSD17B4 |
细胞衰老相关蛋白1抗体 Anti-SEN1/Mortality factor 4-like protein 1 |
ADCK1蛋白抗体 |
样物质结合蛋白/细胞粘附分子样蛋白抗体 Anti-OPCML |
ADCK1 |
脑表皮生长因子跨膜蛋白DNER抗体8 hydroxyguanine DNA glycosylase; 8 oxoguanine DNA glycosylase 1; 8-oxoguanine DNA glycosylase; AP lyase; DNA apurinic or apyrimidinic site lyase; DNA lyase; DNA-(apurinic or apyrimidinic site) lyase; HMMH; HOGG 1; HOGG1; MMH; MUTM; N-glycosylase; Ogg 1; OGH 1; OGH1; OGG1_HUMAN. |