一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ010953 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ010953 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ010953 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
英文名称:MLC1
中文名称:膜蛋白MLC1抗体
别 名;KIAA0027; LVM; Megalencephalic leukoencephalopathy with subcortical cysts 1; Membrane protein MLC1; MLC; MLC-1; MLC1_HUMAN; VL; WKL1.
研究领域;细胞生物 神经生物学 信号转导 通道蛋白 细胞膜蛋白
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应; Rat, (predicted: Human, Mouse, Dog, Pig, Horse, Rabbit, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;41kDa
细胞定位;细胞浆 细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human MLC1: 321-377/377
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
MLC1 is a 377 amino acid multi-pass membrane protein that may serve as a non-selective neuronal cation channel in brain. Mutant MLC1 proteins that show impaired folding have been corrected in vitro with the addition of a Ca(2+)-ATPase inhibitor, curcumin. Mutations in the gene encoding MLC1 is the cause of megalencephalic leukoencephalopathy
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
大鼠胸腺活化调节趋化因子(TARC/CCL17)elisa检测试剂盒 |
骨诱导因子抗体 Anti-OIF |
NDUFB6蛋白抗体 |
14-3-3蛋白/14-3-3 α/β/γ/δ/ε亚型抗体 Anti-14-3-3 (Alpha, Beta, Gamma, Delta, Epsilon) |
NDUFB6 |
Rabbit Anti-Chicken IgM / AP |
生长因子受体结合适应蛋白抗体 |
跨膜蛋白29抗体 |
人间α-胰蛋白酶抑制因子重链H1(ITIH1)elisa生化检测试剂盒 |
碱性磷酸酶(AP)标记的兔抗鸡IgM |
鱼神经肽Y(NPY)elisa生化检测试剂盒 |
FAM156A |
PSAUSELISAKit |
人L选择素(L-Selectin/CD62L)elisa生化检测试剂盒 |
人超敏前列腺特异性抗原(PSA-U S)elisa生化检测试剂盒 |
小鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)elisa生化检测试剂盒 |
NPY ELISA kit |
NSEELISAKit |
营养补充剂L-天酶偶联反应比色法定量检测试剂盒 |
HumanL-SelectinELISAkit |
猪单核细胞增多性李斯特菌素O((LLO)elisa生化检测试剂盒 |
大鼠表皮生长因子(EGF)elisa生化检测试剂盒 |
GAPT |
EGF ELISA Kit |
跨膜转运蛋白21抗体 Anti-TMP21 |
人基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/SDF1B)elisa生化检测试剂盒 |
锌指蛋白RIZ1抗体 Anti-PRDM2 |
SDF-1β/SDF1BELISAkit |
膜蛋白MLC1抗体C6orf206; Chromosome 6 open reading frame 206; CILD12; FLJ30845; Mitochondrial ribosomal protein S18A like 1; MRPS18AL1; Radial spoke head 9 homolog; Radial spoke head protein 9 homolog; RSPH 9; rsph9; RSPH9_HUMAN; Uncharacterized protein C6orf206. |