一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ007074 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ007074 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ007074 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Dab1
中文名称:磷脂蛋白受体Dab1抗体
别 名;Dab 1; Disabled homolog 1; Disabled homolog 1
Drosophila; Scm; Scr; Scrambler; Yot; Yotari; Dab, reelin signal transducer,
homolog 1 (Drosophila); Dab1; DAB1_HUMAN.
研究领域;细胞生物 神经生物学 信号转导 细胞膜受体
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Mouse, (predicted: Human, Rat, Chicken, Dog, Pig,
Cow, Horse, Rabbit, Sheep, )
产品应用;IHC-P=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;65kDa
细胞定位;细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human Dab1 : 501-588/588
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
The laminar organization of multiple neuronal types in the cerebral cortex is required for normal cognitive function. In mice, the disabled-1 gene plays a central role in brain development, directing the migration of cortical neurons past previously formed neurons to reach their proper layer. This gene is similar to disabled-1, and the protein encoded by this gene is thought to be a signal transducer that interacts with protein kinase pathways to regulate neuronal
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
S100A1抗体 Anti-S-100/S100A1 |
钙调神经磷酸酶调节蛋白2抗体(唐氏综合征候选区域蛋白1样蛋白2) Anti-RCAN2/DSCR1L1 |
G蛋白偶联受体146抗体 |
甲状腺受体相互作用蛋白1抗体 Anti-TRIP1/PSMC5 |
GPR146 |
C5a ELISA Kit |
DNA聚合酶β抗体 |
人己糖激酶3(HK3)elisa生化检测试剂盒 |
转化生长因子β(TGFβ)抗体 Anti-TGF beta 1/LAP |
大鼠补体片断5a(C5a)elisa生化检测试剂盒 |
NDST1蛋白抗体 |
HK3ELISAKit |
C6orf138 |
大鼠载脂蛋白B100(APOB100)elisa检测试剂盒 |
6号染色体开放阅读框138抗体 |
山羊还原型谷胱甘肽(GSH)elisa检测试剂盒免费代测 |
NDST1 |
植物源性食品土豆(potato)基因检测试剂盒 |
p53相关蛋白P73α抗体 Anti-p73 alpha |
纯化线粒体内膜功能/膜电位红色荧光(TMRE)测定试剂盒 |
转录因子OTX2抗体 Anti-OTX2 |
钾离子通道KIR2.3抗体 |
DNA Polymerase beta |
KIR2.3 |
血管内皮生长因子B167 Anti-VEGFB167 |
脑和急性白血病胞浆蛋白抗体 |
高分子量神经丝蛋白抗体 Anti-NF-H/Neurofilament H/Neurofilament 200/NF200 |
BAALC |
磷脂蛋白受体Dab1抗体Ccdc174; Coiled coil domain containing 174; Uncharacterized protein C3orf19; CC174_HUMAN. |