一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ010772 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ010772 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ010772 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:phospho-MyoD1 (Ser200)
中文名称:磷酸化肌原调节蛋白抗体
别 名;MyoD1 (phospho Ser200); MyoD1 (phospho S200);
p-MyoD1 (phospho S200); MYOD1(phospho S200);Myogenic differentiation 1;
AI503393; bHLHc1; MD1; MGC156574; MYF3; MYOD; MYOD1; PUM; MYOD1_HUMAN.
产品类型;磷酸化抗体
研究领域;细胞生物 信号转导
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Mouse, (predicted: Rat, Pig, Cow, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 Flow-Cyt=1ug/Test
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;34kDa
细胞定位;细胞核
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated Synthesised
phosphopeptide derived from human MyoD1 around the phosphorylation site of
Ser200: DA(p-S)SP
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
MyoD1 belongs to the basic helix-loop-helix family of transcription factors and the myogenic factors subfamily. It regulates muscle cell differentiation by inducing cell cycle arrest, a prerequisite for myogenic initiation. Myod1 is essential for repair of damaged tissue. It activates its own transcription which may stabilize commitment to myogenesis.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
锌指蛋白Zic2抗体 Anti-Zic2 |
磷酸二酯酶4A8抗体 Anti-PDE4A8 |
脱髓鞘相关蛋白SH3TC2N抗体 |
磷酸化色氨酸羟化酶抗体 Anti-phospho-TPH(Ser19) |
SH3TC2 |
Rabbit Anti-Guinea Pig IgG H&L whole serum |
低密度脂蛋白受体相关蛋白10抗体 |
脑胶质瘤发病相关蛋白2抗体 |
S100钙结合蛋白A6抗体 Anti-S100A6 |
兔抗豚鼠IgG H&L抗血清 |
转录因子LBX1抗体 |
GLIPR2 |
COQ3 |
鸡白介素12(IL-12/70)elisa生化检测试剂盒 |
线粒体COQ3抗体 |
小鼠γ干扰素受体(IFN-γR)elisa生化检测试剂盒 |
LBX1 |
IFN-γRELISAKit |
磷酸化Ras特异性鸟嘌呤核苷酸释放因子1 Anti-Phospho-RasGRF1(Ser916) |
IL-12/70 ELISA Kit |
A型流感-NS1抗体(神经氨酸酶1) Anti-nonstructural protein 1/NS1 |
鱼白介素8(IL-8/CXCL8)elisa生化检测试剂盒 |
LRP10 |
IL-8 ELISA Kit |
内脏脂肪组织源性丝氨酸蛋白酶抑制蛋白抗体 Anti-SERPINA12/Vaspin |
人丙二醛(MDA)elisa生化检测试剂盒 |
肌萎缩侧索硬化症相关蛋白2(2号染色体)抗体 Anti-PAPK/ALS2CR2 |
MDAELISAKit |
磷酸化肌原调节蛋白抗体5730409E04Rik; C1orf216; CA216_HUMAN; chromosome 1 open reading frame 216; hypothetical protein LOC127703; UPF0500 protein C1orf216. |