一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ012906 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ012906 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ012906 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:phospho-RPS6KB1 (Thr412)
中文名称:磷酸化核糖体S6蛋白激酶抗体
别 名;S6K1 (phospho T412); p-S6K1 (phospho T412);
RPS6KB1 (phospho Thr412); p70(S6K)-alpha; ribosomal protein S6 kinase; p70 S6
Kinase; P70 Beta1; KS6B1_HUMAN; Ribosomal protein S6 kinase beta-1; 70 kDa ribosomal
protein S6 kinase 1; P70S6K1; p70-S6K 1; Ribosomal protein S6 kinase I;
Serine/threonine-protein kinase 14A; p70 ribosomal S6 kinase alpha; p70 S6
kinase alpha; p70 S6K-alpha; p70 S6KA; S6K; PS6K; S6K1; STK14A; p70-S6K; p70
S6KA; p70-alpha; S6K-beta-1; p70(S6K)-alpha.
产品类型;磷酸化抗体
研究领域; 信号转导 转录调节因子
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应; Human, Mouse, Rat, (predicted: Chicken, Dog, Pig, Cow, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;58kDa
细胞定位;细胞核 细胞浆 细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated Synthesised
phosphopeptide derived from human RPS6KB1 around the phosphorylation site of
Thr412: GF(p-T)YV
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
This gene encodes a member of the ribosomal S6 kinase family of serine/threonine kinases. The encoded protein responds to mTOR (mammalian target of rapamycin) signaling to promote protein synthesis, cell growth, and cell proliferation. Activity of this gene has been associated with human cancer. Alternatively spliced transcript variants have been observed. The use of alternative translation start sites results in isoforms with longer or shorter N-termini which may differ in their subcellular localizations. There are two pseudogenes for this gene on chromosome 17. [provided by RefSeq, Jan 2013].
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
小鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)elisa检测试剂盒 |
过氧化酶活化增生受体γ抗体 Anti-PPAR Gamma |
蛋白甘露糖基转移酶1抗体 |
细胞生长因子激活抑制蛋白2抗体 Anti-SPINT2/HAI2/HGFA Inhibitor 2 |
POMT1 |
Goat Anti-Rat IgG H&L / Cy5.5 |
锌指蛋白823抗体 |
叉头蛋白D3抗体 |
猪儿茶酚胺(CA)elisa生化检测试剂盒 |
Cy5.5标记的羊抗大鼠IgG H&L |
白介素-22抗体 |
FOXD3 |
C1orf181 |
犬癌胚抗原(CEA)elisa生化检测试剂盒 |
1号染色体开放阅读框181抗体 |
小鼠活化素B(ACV-B)elisa生化检测试剂盒 |
IL-22 |
ACV-BELISAKit |
大鼠血管活性肠肽(VIP)elisa检测试剂盒 |
CEA ELISA Kit |
麦芽β-葡聚糖含量荧光定量检测试剂盒 |
猴胰岛素样生长因子1(IGF-1)elisa生化检测试剂盒 |
HSZFP36/ZNF823 |
IGF-1 ELISA KIT |
RNA聚合酶I抗体 Anti-UBF1/RNA polymerase I |
人肥胖抑制素(Obestatin)elisa生化检测试剂盒 |
乳腺癌易感基因相关蛋白2 Anti-PALB2 |
HumanObestatinELISAkit |
磷酸化核糖体S6蛋白激酶抗体FLJ25163; Hypothetical protein LOC541468; Uncharacterized protein C1orf190; LURA1_HUMAN. |