一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ010161 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ010161 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ010161 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Phospho-Jak1 (Tyr1034 + Tyr1035)
中文名称:磷酸化蛋白质酪氨酸激酶JAK-1抗体
别 名;JAK1 (phospho Y1034 + Y1035); p-JAK1 (phospho
Y1034 + Y1035); JAK 1; JAK 1A; JAK 1B; JAK-1; JAK1; JAK1_HUMAN; JAK1A; JAK1B;
Janus kinase 1 (a protein tyrosine kinase); Janus kinase 1; JTK3; Tyrosine
protein kinase JAK 1; Tyrosine protein kinase JAK1; Tyrosine-protein kinase
JAK1.
产品类型;磷酸化抗体
研究领域; 细胞生物 染色质和核信号 信号转导 细胞凋亡 激酶和磷酸酶 表观遗传学
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, (predicted: Mouse, Rat, Pig, Cow, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 Flow-Cyt=2μg /Test
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;133kDa
细胞定位;细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated Synthesised
phosphopeptide derived from human Jak1 around the phosphorylation site of
Tyr1034 + Tyr1035: KE(p-Y)(p-Y)TV
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Janus kinase 1 (JAK1) is a member of a new class of non-receptor protein-tyrosine kinases (PTK) characterized by the presence of a second phosphotransferase-related domain immediately N-terminal to the PTK domain. The second phosphotransferase domain bears all the hallmarks of a protein kinase, although its structure differs significantly from that of the PTK and threonine/serine kinase family members. JAK1 is a large, widely expressed membrane-associated phosphoprotein. It is involved in the interferon-alpha/beta and -gamma signal transduction pathways. The reciprocal interdependence between JAK1 and TYK2 activities in the interferon-alpha pathway, and between
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
电压门控钠通道SCN3B蛋白抗体 Anti-SCN3B |
孤儿核受体抗体 Anti-ROR Gamma/RORC/NR1F3 |
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FHOD3蛋白抗体 Anti-FHOD3 |
Rabbit Anti-Horse IgG H&L / Cy5.5 |
AP12 ELISA Kit |
表皮生长因子样蛋白6抗体 |
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原钙粘蛋白γA9抗体 |
TGELISAKit |
CATSPER4 |
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阳离子通道精子相关蛋白4抗体 |
人凝血因子IX(F IX)elisa检测试剂盒 |
PCDHGA9 |
乳品D-葡萄糖激酶法定量检测试剂盒 |
磷脂酸磷酸酶2C抗体 Anti-PAP2c/AP2-gamma |
猪降钙素原(PCT)elisa检测试剂盒 |
磷酸化端粒酶结合蛋白P23抗体 Anti-phospho-p23 (Ser113) |
甲基CpG结合域蛋白3样2抗体 |
EGFL6 |
MBD3L2 |
内脏异位相关蛋白/锌指蛋白203抗体 Anti-ZIC3 |
19号染色体开放阅&# |
膜内在蛋白NOD26抗体 Anti-NLRX1/NOD26/NOD9 |
C19orf43 |
磷酸化蛋白质酪氨酸激酶JAK-1抗体Chromosome 1 open reading frame 159; FLJ20584; FLJ21143; FLJ36119; Hypothetical protein LOC54991; OTTHUMP00000000896; OTTHUMP00000044090; RP11-465B22.4; Uncharacterized protein C1orf159; CA159_HUMAN. |