一抗操作步骤：
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭：这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合，从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点，以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉，缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1～2小时，特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜，以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育：在一抗孵育之前，需要参考一抗的说明书，按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后，立即加入稀释好的一抗，室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1～2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳，可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗，加入Western洗涤液，在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟，共洗涤3次。如果结果背景较高，可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤：洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合，洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液，其中的Tween20有助于去除非特异性的结合，减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定，建议清洗3-5次，每次5分钟。
|
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
|
BJ003735 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
|
BJ003735 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
|
BJ003735 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性：
英文名称：phospho-AKT3 (Ser472)
中文名称：磷酸化蛋白激酶AKT3抗体
别 名；Akt3; AKT3 kinase; AKT3_HUMAN; DKFZp434N0250;
PKB gamma; PKBG; PRKBG; Protein kinase Akt-3; Protein Kinase AKT3; Protein
kinase B gamma; RAC gamma; RAC gamma serine/threonine protein kinase; RAC-gamma
serine/threonine-protein kinase; RAC-PK-gamma; RACPK Gamma; Serine threonine
protein kinase Akt 3; Serine threonine protein kinase Akt3; STK 2; STK-2; STK2;
V akt murine thymoma viral oncogene homolog 3 protein kinase B gamma.
产品类型；磷酸化抗体
研究领域； 细胞生物 信号转导 激酶和磷酸酶
抗体来源；Rabbit
克隆类型；Polyclonal
交叉反应；Human, Mouse, Rat, (predicted: Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit,
Sheep, )
产品应用；WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 （石蜡切片需做抗原修复）
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量；56kDa
细胞定位；细胞核 细胞浆 细胞膜
性 状；Liquid
浓 度；1mg/ml
免 疫 原；KLH conjugated Synthesised
phosphopeptide derived from human AKT3 around the phosphorylation site of
Ser472: QF(p-S)YS
亚 型；IgG
纯化方法；affinity purified by Protein A
保存条件；Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项；This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍：
Akt, protein kinase B (PKB), is a serine/threonine kinase which is involved in many cellular signaling pathways and acts as a transducer of many functions initiated by growth factor receptors that activate phosphtidylinositol 3 kinase (PI 3 kinase). The major activity of Akt/PKB is to mediate cell survival. Akt/PKB is also believed to be a critical factor in the genesis of cancer as the tumor suppressor PTEN was found to antagonise PI3 kinase and Akt/PKB kinase activity. There are 3 known isoforms of this enzyme in mammalian cells (1/alpha, 2/beta and 3/gamma). IGF1 leads to the activation of AKT3, which may play a role in regulating cell survival. It is capable of phosphorylating several known proteins.
抗体注意事项：
确定抗体的名字和特性：注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息，这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型：了解你的实验类型（如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS），因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型，并不意味着该抗体不适用于该实验，只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属：确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等，因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质：了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体，特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时，这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择：单克隆抗体特异性强但亲和力相对小，而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性：原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体，避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择：封闭液的选择应根据抗体说明书进行，常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点，降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项：使用干净的孵育盒子，避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白，可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品：
|
锌指蛋白749抗体 Anti-ZNF749 |
p21激活激酶1抗体 Anti-PAK1 |
|
ATP依赖解旋酶SMARCA2抗体 |
马铃薯球蛋白(结节性硬化)抗体 Anti-Tuberin/TSC2 |
|
SMARCA2 |
Goat IgG / PE-Cy3 |
|
钙依赖膜结合蛋白Copine蛋白3抗体 |
锌指蛋白821抗体 |
|
磷酸化脑质膜单胺转运蛋白PMAT抗体 Anti-phospho-SLC29A4(Tyr198) |
PE-Cy3标记羊IgG（型对照) |
|
减数分裂阻滞蛋白1抗体 |
ZNF821 |
|
Bile salt-activated lipase |
鸡B因子(BF)elisa生化检测试剂盒 |
|
胆盐激活脂肪酶抗体 |
小鼠α甘露糖苷酶(α Manase)elisa生化检测试剂盒 |
|
LIMKAIN B1 |
αManaseELISAKit |
|
视黄酸受体应答蛋白2抗体 Anti-TIG2 |
BF ELISA Kit |
|
中心体相关蛋白激酶Nek2抗体 Anti-NEK2 |
鸭子催乳素(PRL/LTH)elisa生化检测试剂盒 |
|
CPNE3 |
PRL/LTH ELISA Kit |
|
神经颗粒蛋白5抗体 Anti-Sg V/Secretogranin V |
人板层素相关多肽2亚型α(TMPO)elisa生化检测试剂盒 |
|
磷酸甲羟戊酸激酶抗体 Anti-PMVK |
HumanTMPOELISAKit |
|
磷酸化蛋白激酶AKT3抗体ALAESM; Chromosome 1 open reading frame 122; FLJ23476; FLJ45459; Hypothetical protein LOC127687; Protein ALAESM; Uncharacterized protein C1orf122;CA122_HUMAN. |
|