一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ011387 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ011387 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ011387 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:phospho-IKB alpha (Tyr42)
中文名称:磷酸化IKB α抗体
别 名;IKB alpha (phospho Y42); p-IKB alpha (phospho
Y42); phospho-NFKBIA(Tyr42); NFKBIA(phospho Y42); IKB-alpha(Phospho-Tyr42); IKB
alpha; Inhibitor of KB alpha; I kappa B alpha; I(Kappa)B(alpha); IkappaBalpha;
IKBA; IKBalpha; MAD 3; MAD3; Major histocompatibility complex enhancer binding
protein MAD3; NF kappa B inhibitor alpha; NFKBI; NFKBIA; Nuclear factor of
kappa light chain gene enhancer in B cells; Nuclear factor of kappa light
polypeptide gene enhancer in B cells inhibitor alpha; IKBA_HUMAN.
产品类型;磷酸化抗体
研究领域; 信号转导 干细胞 转录调节因子 激酶和磷酸酶
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Mouse, (predicted: Pig, Cow, Rabbit, Sheep, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1μg/Test IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;35kDa
细胞定位;细胞核 细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated Synthesised
phosphopeptide derived from human IKB alpha around the phosphorylation site of
Tyr42: EE(p-Y)EQ
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid
repeated freeze/thaw cycles.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
This gene encodes a member of the NF-kappa-B inhibitor family, which contain multiple ankrin repeat domains. The encoded protein interacts with REL dimers to inhibit NF-kappa-B/REL complexes which are involved in inflammatory responses. The encoded protein moves between the cytoplasm and the nucleus via a nuclear localization signal and CRM1-mediated nuclear export. Mutations in this gene have been found in ectodermal dysplasia anhidrotic with T-cell immunodeficiency autosomal dominant disease. [provided by RefSeq, Aug 2011].
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
大鼠CD34分子(CD34)elisa检测试剂盒 |
原钙粘蛋白γA8抗体 Anti-PCDHGA8 |
环指蛋白185抗体 |
泛素蛋白连接酶C抗体 Anti-UBE2C |
RNF185 |
Rabbit Anti-Human IgG F(ab')₂ / RBITC |
驱动蛋白家族成员3B抗体 |
GalNAc-T4 抗体 |
狗15 - 酮基-13,14-二氢前列腺素F2α(15-keto-13,14-dihydro-PGF2α)elisa生化检测试剂盒 |
罗丹明标记的兔抗人IgG H&L F(ab')2 |
钾离子通道蛋白13抗体 |
GALNT4 |
CDK2AP2 |
绵羊白介素6(IL-6)elisa生化检测试剂盒 |
细胞周期素依赖激酶2相关蛋白2抗体 |
小鼠单克隆抗体亚型鉴定elisa生化检测试剂盒 |
KCNK13 |
MousemonoclonalantibodyisotypingELISAkit |
人体CYCLIN D1 RFLP基因分析试剂盒 |
IL-6 ELISA Kit |
小鼠成纤维细胞激活蛋白α(FAPα)elisa检测试剂盒 |
海狮雌二醇(E2)elisa生化检测试剂盒 |
KIF3B |
E2 ELISA kit |
钠氢通道蛋白9家族A9抗体 Anti-SLC9A9 |
人胆红素氧化代谢物 elisa生化检测试剂盒 |
猪圆环Ⅱ型衣壳蛋白 Anti-capsid protein |
HumanBiopyrrinELISAKit |
磷酸化IKB α抗体C13orf32; chromosome 13 open reading frame 32; FLJ30046; MGC131899; SLAI1_HUMAN; SLAIN motif family member 1; SLAIN motif family, member 1; SLAIN motif-containing protein 1; Slain1. |