一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ012022 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ012022 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ012022 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:PGAM1
中文名称:磷酸变位酶1抗体
别 名;BPG dependent PGAM 1; BPG dependent PGAM1;
BPG-dependent PGAM 1; OTTHUMP00000059414; PGAM 1; PGAM A; PGAM B; PGAM-B;
PGAM1_HUMAN; PGAMA; PGAMB; Phosphoglycerate mutase 1; Phosphoglycerate mutase 1
brain; Phosphoglycerate mutase A; Phosphoglycerate mutase A nonmuscle form;
Phosphoglycerate mutase isozyme B.
研究领域; 信号转导 新陈代谢
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Mouse, Rat, (predicted: Human, Dog, Pig, Cow, Horse,
Sheep, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;29kDa
细胞定位;细胞浆 细胞外基质
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide
derived from human PGAM2: 101-200/254
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
PGAM1 belongs to the
phosphoglycerate mutase family, BPG-dependent PGAM subfamily. It is involved in
the interconversion of 3- and 2-phosphoglycerate with 2,3-bisphosphoglycerate
as the primer of the reaction.
Interconversion of 3- and 2-phosphoglycerate with 2,3-bisphosphoglycerate as the primer of the reaction. Can also catalyze the reaction of EC 5.4.2.4 (synthase) and EC 3.1.3.13 (phosphatase), but with a reduced activity.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
FITC标记人CD45单克隆抗体 human CD45-FITC |
RB1的诱导卷曲蛋白RB1CC1抗体 RB1CC1/FIP200 |
人白蛋白(ALB)elisa检测试剂盒 |
丝氨酸/苏氨酸激酶蛋白PIM1+PIM3抗体 PIM1+PIM3 |
Carnoy固着液 |
肌细胞特异性增强因子2D抗体 MEF2D |
小鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B)elisa检测试剂盒 |
甲基抗体 Methamphetamine |
11(FACTOR Xia)活性荧光定量检测试剂盒 |
酸敏感钾离子通道蛋白3抗体 KCNK3 |
大鼠超氧化物歧化酶(SOD)elisa检测试剂盒 |
17号染色体开放阅读框82抗体 C17orf82 |
大鼠髓鞘相关糖蛋白(MAG)elisa检测试剂盒 |
20号染色体开放阅读框151抗体 C20orf151 |
细胞氧化应激 |
对氧磷酶3抗体 PON3 |
M13噬菌体培养试剂盒 |
宿主细胞因子Zhangfei抗体 Zhangfei |
小鼠游离甲状腺素(FT4)elisa检测试剂盒 |
迪格弗-梅尔基奥尔-克劳森综合征相关蛋白抗体 Dymeclin |
大鼠极低密度脂蛋白(VLDL)elisa分析检测试剂盒 |
血管生成素样蛋白3抗体 ANGPTL3 |
细胞SYK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
颅面部发育蛋白1抗体 CFDP1 |
人抗环瓜氨酸肽抗体(CCP)elisa检测试剂盒 |
球蛋白超家族成员5抗体 IGSF5 |
RAB27B单克隆抗体 RAB27B |
FAM36A蛋白抗体 FAM36A |
磷酸变位酶1抗体检查点蛋白HUS1B抗体 HUS1B 研究领域;细胞生物 转录调节因子 表观遗传学 9号染色体开放阅读框117抗体 C9orf117 研究领域;细胞生物 发育生物学 微管蛋白β辅助因子D抗体 Beta tubulin cofactor D 研究领域; 细胞生物 信号转导 细胞周期蛋白 细胞骨架 细胞外基质 TMEM15/跨膜蛋白15抗体 DOLK 研究领域;细胞生物 跨膜蛋白 细胞膜蛋白 |