一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ007694 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ007694 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ007694 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:EphB2
中文名称:酪氨酸蛋白激酶受体B2抗体
别 名;PHB2_HUMAN; Ephrin type-B receptor 2; EC:2.7.10.1;
Developmentally-regulated Eph-related tyrosine kinase; ELK-related tyrosine
kinase; EPH tyrosine kinase 3; EPH-like kinase 5 (EK5; hEK5); Renal carcinoma
antigen NY-REN-47; Tyrosine-protein kinase TYRO5; Tyrosine-protein kinase
receptor EPH-3; EphB2/CTF1; EphB2/CTF2; DRT; EPHT3; EPTH3; TYRO5; CAPB; PCBC;
BDPLT22;
研究领域; 生长因子和
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Mouse, Rat, (predicted: Chicken, Dog, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;114kDa
细胞定位;细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human EphB2: 101-200/1055 <Extracellular>
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
This gene encodes a member of the Eph receptor family of receptor tyrosine kinase transmembrane glycoproteins. These receptors are composed of an N-terminal glycosylated ligand-binding domain, a transmembrane region and an intracellular kinase domain. They bind ligands called ephrins and are involved in diverse cellular processes including motility, division, and differentiation. A distinguishing characteristic of Eph-ephrin signaling is that both receptors and ligands are competent to transduce a signaling cascade, resulting in bidirectional signaling.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
7号染色体开放阅读框25抗体 C7orf25 |
FMS样酪氨酸激酶3 FLT3 |
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硫氧还蛋白抗体 Thioredoxin |
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低密度脂蛋白受体相关蛋白9抗体 SorLA |
小鼠抑制素A(INH-A)elisa检测试剂盒 |
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大鼠卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG)elisa检测试剂盒 |
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D-木糖测试盒 50管/48样 比色法 |
血管**素3/血管**素4抗体 Angiopoietin 4 |
小鼠泛素(Ub)elisa检测试剂盒 |
RRAGD蛋白抗体 RRAGD |
细胞染色质沉淀分析(CHIP)完全试剂盒(包括抗体) |
死亡相关蛋白1抗体 DAP1 |
活体细胞线粒体形态/活性荧光染色试剂盒 |
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大鼠血栓素合成酶(TXAS)elisa检测试剂盒 |
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糖类乳糖含量酶连续反应光谱法定量检测试剂盒 |
急性细胞性白血病1抗体 KMT2A |
小鼠L-乳酸脱氢酶A链(LDH-A)elisa分析检测试剂盒 |
钾离子通道KIR2.3抗体 KIR2.3 |
FITC标记人CD41单克隆抗体 human CD41/FITC |
1号染色体开放阅读框65抗体 C1orf65 |
酪氨酸蛋白激酶受体B2抗体锌指结构蛋白酶20抗体 ZDHHC20 研究领域;细胞生物 通道蛋白 细胞膜蛋白 蛋白酪氨酸磷酸酶相互作用蛋白51抗体 PTPIP51 研究领域; 细胞生物 细胞周期蛋白 FITC标记人CD279 (PD-1)单克隆抗体 human CD279 (PD-1)/FITC 抗体来源;Mouse 膜二肽酶3抗体 DPEP3 研究领域;信号转导 细胞周期蛋白 细胞分化 |