一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ005851 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ005851 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ005851 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:CCDC96
中文名称:卷曲螺旋结构域蛋白96抗体
别 名;CCDC96; CCDC 96; Coiled coil domain containing 96; FLJ90575; MGC138479; CCD96_HUMAN.
研究领域;细胞生物
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, (predicted: Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Sheep, )
产品应用;WB=1:500-2000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;63kDa
细胞定位;细胞核
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human CCDC96: 301-400/555
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
PubMedPubMe
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
MEGF9蛋白抗体 MEGF9 |
白细胞介素1受体相关蛋白激酶M抗体 IRAKM |
兔基质金属蛋白酶-3elisa检测试剂盒 |
细胞外基质糖蛋白MMRN2抗体 MMRN2 |
体液人体鼻病毒(rhinovirus)定量PCR扩增检测试剂盒 |
磷酸半乳糖尿苷酸转移酶1抗体 GALT |
鱼5羟色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)elisa检测试剂盒 |
磷酸化Myc基因相关X因子抗体 phospho-MAX protein (Tyr123) |
石蜡切片中性脂质尼罗红间接染色试剂盒 |
酰基辅酶A结合结构域蛋白6抗体 ACBD6 |
大鼠神经肽Y(NP-Y)elisa检测试剂盒 |
ATP依赖的解螺旋酶抗体 CHD9 |
裸鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)elisa检测试剂盒 |
BUP小鼠单抗 BUP |
小鼠踝蛋白(TLN)elisa检测试剂盒 |
过氧化还原酶5抗体 Peroxiredoxin-5 |
Caspase 8 活性检测试剂盒50T |
致死因子恶性脑瘤样蛋白1抗体 L3MBTL1 |
活力伊红苯胺黑(eosin-nigrosin)染色试剂盒 |
谷氨酰胺转胺酶3抗体 TGM3 |
大鼠肿瘤特异生长因子(TSGF)elisa检测试剂盒 |
肿瘤相关抗原L6抗体 TAAL6 |
通用型牛白血病(Bovine Leukemia Virus/Enzootic Bovine Leukosis;BLV/EBL)基因检测试剂盒 |
溶质载体家族10成员7抗体 SLC10A7 |
小鼠白介素17C(IL17C)elisa检测试剂盒 |
乳腺癌相关蛋白1抗体 BIN2 |
癌症/睾丸抗原103抗体 Semenogelin I/CT103 |
KLF样转录因子8抗体 KLF8 |
卷曲螺旋结构域蛋白96抗体白血病相关蛋白18/癌蛋白18重组兔单克隆抗体 STMN1 研究领域;染色质和核信号 转录调节因子 腺苷酸激酶-1单克隆抗体 Adenylate Kinase 1 研究领域; 心血管 信号转导 新陈代谢 磷酸化磷脂酰肌醇激酶PIK3-γ抗体 phospho-PIK3 gamma (Thr1024) 产品类型磷酸化抗体 DNA支架修复蛋白抗体 SPIDR 研究领域;细胞生物 表观遗传学 |