一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ011804 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ011804 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ011804 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Nucleophosmin
中文名称:核仁磷酸蛋白抗体
别 名;B23; B23; MGC104254; NMP1; NMP1; NO38; NPM 1; NPM; NPM_HUMAN; NPM1; Nucleolar Phosphoprotein B23; Nucleolar Phosphoprotein B23; Nucleolar protein NO38; Nucleophosmin (nucleolar phosphoprotein B23 numatrin); Nucleophosmin; Nucleophosmin/B23.2; Nucleophosmin/nucleoplasmin family member 1; Nucleoplasmin Family Member 1; Nucleoplasmin Family Member 1; Numatrin; Numatrin; OTTHUMP00000161024; OTTHUMP00000161025; OTTHUMP00000223397; OTTHUMP00000223398; TRK fused gene.
研究领域; 细胞生物 信号转导 细胞凋亡 细胞周期蛋白 转录调节因子
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Mouse, Rat, (predicted: Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, )
产品应用;WB=1:500-2000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;32kDa
细胞定位;细胞核
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic peptide derived from human NPM: 51-150/294
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
This gene encodes a phosphoprotein which moves between the nucleus and the cytoplasm. The gene product is thought to be involved in several processes including regulation of the ARF/p53 pathway. A number of genes are fusion partners have been characterized, in particular the anaplastic lymphoma kinase gene on chromosome 2. Mutations in this gene are associated with acute myeloid leukemia. More than a dozen pseudogenes of this gene have been identified. Alternative splicing results in multiple transcript variants.[provided by RefSeq, Nov 2009].
Involved in diverse cellular processes such as ribosome biogenesis, centrosome duplication, protein chaperoning, histone assembly, cell proliferation, and regulation of tumor suppressors p53/TP53 and ARF. Binds ribosome presumably to drive ribosome nuclear export. Associated with nucleolar ribonucleoprotein structures and bind single-stranded nucleic acids. Acts as a chaperonin for the core histones H3, H2B and H4. Stimulates APEX1 endonuclease activity on apurinic/apyrimidinic (AP) double-stranded DNA but inhibits APEX1 endonuclease activity on AP single-stranded RNA. May exert a control of APEX1 endonuclease activity within nucleoli devoted to repair AP on rDNA and the removal of oxidized rRNA molecules.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
衍生透明质酸相关蛋白抗体
原钙粘附蛋白12/血管内皮钙粘蛋白2抗体 Anti-PCDH12
ITIH1
14-3-3β抗体 Anti-14-3-3 beta
碳酸酐酶相关蛋白8抗体
Donkey Anti-Rabbit IgG H&L / PE-Cy7
CA8
FXYD离子转运调节因子7抗体
RAGEF2蛋白抗体
PE-Cy7标记的驴抗兔IgG H&L
Caspase 10 活性检测试剂盒100T
FXYD7
石蜡切片胆色素史汀(Stein)染色试剂盒
牛维生素C(VC)elisa分析检测试剂盒
驴透明质酸(HA)elisa分析检测试剂盒
小鼠肝细胞生长因子激活物(HGFAC)elisa分析检测试剂盒
小鼠红细胞**素(EPO)elisa检测试剂盒
HGFACELISAkit
RAGEF2
VC ELISA Kit
舞蹈症相关蛋白KALRN抗体
骆驼天门冬氨酸氨基转移酶(AST)elisa分析检测试剂盒
KALRN
AST ELISA kit
泛素融合降解样蛋白1抗体 Anti-UFD1L
人低氧诱导因子2(HIF-2)elisa分析检测试剂盒
蛋白质磷酸酶2调节亚基3A抗体 Anti-PPP2R3A
HumanHIF-2ELISAkit
核仁磷酸蛋白抗体PRDM锌指转录因子PRDM13抗体 PRDM13 研究领域;细胞生物 转录调节因子 锌指蛋白 表观遗传学 死亡相关蛋白5抗体 DAP5 研究领域;细胞生物 染色质和核信号 细胞凋亡 甲状腺素T4抗体 T4/L-Thyroxine 产品类型小分子抗体 6号染色体开放阅读框20抗体 LY6G5C/C6orf20 研究领域;细胞生物 细胞 t-细胞