一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ006290 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ006290 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ006290 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:CROT
中文名称:过氧化物酶体肉碱酰基转移酶抗体
别 名;Carnitine O octanoyltransferase; COT; CROT;
OCTC_HUMAN; Peroxisomal carnitine acyltransferase; Peroxisomal carnitine O
octanoyltransferase; Peroxisomal carnitine O-octanoyltransferase.
研究领域; 细胞生物 信号转导 激酶和磷酸酶
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Rat, (predicted: Human, Mouse, Pig, Horse, Rabbit,
)
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;70kDa
细胞定位;细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human CROT/COT: 201-275/612
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
This gene encodes a
member of the carnitine/choline acetyltransferase family. The encoded protein
converts 4,8-dimethylnonanoyl-CoA to its corresponding carnitine ester. This
transesterification occurs in the peroxisome and is necessary for transport of
medium- and long- chain acyl-CoA molecules out of the peroxisome to the cytosol
and mitochondria. The protein thus plays a role in lipid metabolism and fatty
acid beta-oxidation. Alternatively spliced transcript variants have been
described.
Beta-oxidation of fatty acids. The highest activity concerns the C6 to C10 chain length substrate. Converts the end product of pristanic acid beta oxidation, 4,8-dimethylnonanoyl-CoA, to its corresponding carnitine ester.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
貂环磷酸腺苷(cAMP)elisa分析检测试剂盒
磷酸化Nemo样激酶抗体 Anti-Phospho-Nemo-like
kinase (Thr298)
cAMP ELISA Kit
视黄酸激活基因8抗体 Anti-Stra8
人单胺氧化酶(MAO)elisa分析检测试剂盒
Rabbit Anti-Bovine
IgG H&L / PE-Cy3
MAOELISAKit
EXPH5蛋白抗体
NAALADL2蛋白抗体
PE-Cy3标记的兔抗牛IgG H&L
大鼠环磷腺苷(cAMP)elisa检测试剂盒
EXPH5
体外非细胞系统细胞色素P450亚酶4A1(LAURIC ACID)活性
人SHC转化蛋白1(SHC1)elisa分析检测试剂盒
人核因子κB抑制物激酶α(IKK-α)elisa分析检测试剂盒
小鼠糖原磷酸化酶工酶BB(GP-BB)elisa分析检测试剂盒
中性转化酶(NI)测试盒
GP-BBELISAKit
NAALADL2
HumanSHC1ELISAKit
肽基脯氨酰顺反异构酶FKBP11抗体
大鼠催产素(OT)elisa分析检测试剂盒
FKBP11
OT ELISA Kit
端粒酶调节相关蛋白抗体 Anti-TRAP/Tartrate Resistant Acid
Phosphatase
人结蛋白(DES)抗体elisa分析检测试剂盒
P21蛋白激活的蛋白激酶6抗体 Anti-PAK6
Humananti-desmin(DES)antibodyELISAkit
过氧化物酶体肉碱酰基转移酶抗体解旋酶SNF2L抗体 SNF2L 研究领域;细胞生物 染色质和核信号 表观遗传学 AF647标记人CD11c单克隆抗体 human CD11c/AF647 抗体来源;Mouse 硒结合蛋白1抗体 Selenium Binding Protein 1 研究领域; 神经生物学 信号转导 UHRF1BP1蛋白抗体 UHRF1BP1 研究领域;细胞生物 细胞周期蛋白