一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ012510 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ012510 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ012510 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:PADI4
中文名称:关节炎相关基因抗体
别 名;EC 3.5.3.15; HL 60 PAD; HL-60 PAD; PAD 4; PAD;
PADI 4; PADI 5; PADI H protein; PADI5; PDI 4; PDI 5; PDI4; PDI5; Padi4;
PADI4_HUMAN; Peptidyl arginine deiminase type IV; Peptidyl arginine deiminase
type V; Peptidylarginine deiminase IV; Protein arginine deiminase;
Protein-arginine deiminase type IV; Protein-arginine deiminase type-4; Protein
arginine deiminase type 4; Protein arginine deiminase type IV.
染色质和核信号 信号转导 新陈代谢 表观遗传学
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human,
产品应用;ELISA=1:5000-10000
IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;74kDa
细胞定位;细胞核 细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human PADI4: 401-500/663
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
PADI4 (peptidyl arginine deiminase, type IV) catalyzes the deimination of arginine residues of proteins. Down-regulates histone H3 and H4 arginine methylation, both by preventing arginine methylation by CARM1 and HRMT1L2/PRMT1 and by converting methylarginine to citrulline.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
DNAJB8蛋白抗体 DNAJB8
转化生长因子β2(TGFβ2)抗体 TGF beta 2
D型多巴色素脱羧酶抗体 DDCT
组蛋白替换精蛋白DGGR1抗体 HIRA
磷酸化富亮氨酸重复激酶2抗体 phospho-LRRK2 (Thr1410)
组织苹果酸脱氢酶(MDH)活性比色法定量检测试剂盒
磷酸化酶β抗体 PHKB
小鼠类固醇5α还原酶1(SRD5α1)elisa检测试剂盒
OTOP2蛋白抗体 OTOP2
人白介素13(IL-13)elisa检测试剂盒
表皮生长因子样受体1(EMR1)抗体 ADGRE1
大鼠肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)elisa检测试剂盒
锌指蛋白140抗体 ZNF140
乙醇比色法定量检测试剂盒
腺苷酸环化酶激活肽受体-II/血管活性肠肽受体-II抗体 VPAC2R
大鼠血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)elisa检测试剂盒
叉头蛋白P4抗体 FOXP4
石蜡切片组织BAD蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
PE-Cy5标记人CD43单克隆抗体 human CD43/PE-Cy5
小鼠DNA损伤诱导转录因子3(DDIT3)elisa检测试剂盒
神经母细胞瘤相关蛋白ARID3B抗体 BDP
小鼠肿瘤坏死因子α(TNFα)elisa检测试剂盒
神经元电压门控钠通道蛋白β2/Na+ CP type IIβ抗体 SCN2B
大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)elisa检测试剂盒
核糖核苷酸还原酶亚基R2抗体 RRM2
细胞乙酰酯酶活性化学发光法定量检测试剂盒
黑色素瘤相关抗原抗体 CD63
三聚氰胺ELISA快速检测试剂盒
关节炎相关基因抗体脑单胺类神经递质转运蛋白抗体 VMAT2 研究领域;细胞生物 神经生物学 Gemin8蛋白抗体 Gemin 8 研究领域;细胞生物 表观遗传学 抑癌基因NDRG2抗体 NDRG2 研究领域; 细胞生物 神经生物学 细胞周期蛋白 Alzheimer's 复制因子A蛋白2 RPA32 染色质和核信号