一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ007541 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ007541 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ007541 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:EAA1
中文名称:谷氨酸受体KA1抗体
别 名;EAA 1; EAA1; Excitatory amino acid receptor 1;
Glutamate receptor; Glutamate receptor ionotropic kainate 4; Glutamate receptor
ionotropic kainate 4 precursor; Glutamate receptor KA 1; Glutamate receptor KA
1precursor; Glutamate receptor KA-1; Glutamate receptor KA1; Glutamate
receptor, ionotropic kainate 4; GRIK 4; GRIK; GRIK4; GRIK4_HUMAN; ionotropic
kainate 4; KA 1; KA1; OTTHUMP00000045951; OTTHUMP00000231881.
研究领域;神经生物学 通道蛋白 细胞膜受体
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;(predicted: Human, Mouse, Rat,
Dog, Pig, Cow, Horse, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;105kDa
细胞定位;细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human EAA1: 451-550/956 <Extracellular>
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Glutamate receptors
mediate most excitatory neurotransmission in the brain and play an important
role in neural plasticity, neural development and neurodegeneration. Ionotropic
glutamate receptors are categorized into NMDA receptors and kainate/AMPA
receptors, both of which contain glutamate-gated, cation-specific ion channels.
Kainate/AMPA receptors are co-localized with NMDA receptors in many synapses
and consist of the structurally related subunits GluR-1 to -7, KA1 and KA2. KA1
(also designated EEA1) and KA2 (also designated EEA2) form heteromeric
receptors with GluR subunits when coexpressed, forming ion channels with
various properties . The kainate/AMPA receptors are primarily responsible for
the fast excitatory neuro-transmission by glutamate.
Receptor for glutamate. L-glutamate acts as an excitatory neurotransmitter at many synapses in the central nervous system. The postsynaptic actions of Glu are mediated by a variety of receptors that are named according to their selective agonists.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
衰老标记蛋白30抗体 Regucalcin
磷酸化糖原合酶激酶-3α抗体 phospho-GSK3A (Ser21)
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Smg1抗体 SMG1
磷脂重塑基因SERAC1抗体 SERAC1
PE-Cy5标记小鼠CD3e单克隆抗体 Mouse
CD3e/PE-Cy5
细胞钙离子浓度荧光定量检测试剂盒
PE标记人CD24单克隆抗体 human CD24/PE
小鼠Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)elisa分析检测试剂盒
锌指蛋白925抗体 ZBTB42
粪便基因组提取试剂盒 50次
组蛋白去乙酰化酶5抗体 HDAC5
THROMBIN处理试剂盒
环指蛋白67抗体 NEURL
体液诱导型巨噬细胞一氧化氮合成酶(iNOS /NOS2/mNOS)活性荧光定量检测试剂盒
红细胞2,3 - 二磷酸甘油酸合成酶抗体 BPGM
大鼠大内皮素1elisa检测试剂盒
17β羟基类固醇脱氢酶13/17β-HSD13抗体 HSD17B13
小鼠载脂蛋白B100(Apo B100)elisa检测试剂盒
胸腺细胞核蛋白1抗体 THYN1
人补体3裂解产物(C3SP)elisa检测试剂盒
促甲状腺α重组兔单克隆抗体 CGA
小鼠端粒酶关联蛋白1(TEP1)elisa检测试剂盒
蛋氨酸亚砜还原酶B3抗体 MSRB3
大鼠Apelin受体(APLNR)elisa检测试剂盒
ENGASE蛋白抗体 ENGASE
基因甲基化检测DNA修饰试剂盒
FAM199X蛋白抗体 FAM199X
人Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)elisa检测试剂盒
谷氨酸受体KA1抗体组织相容性抗原DP抗体 HLA-DPA1 研究领域;细胞生物 肌动蛋白结合蛋白Fascin抗体 FSCN1 研究领域; 细胞生物 信号转导 细胞骨架 P物质抗体 Substance P 研究领域;神经生物学 新陈代谢 髓鞘基因调控因子抗体 MRF/C11orf9 研究领域;细胞生物 神经生物学 转录调节因子 表观遗传学