一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ014419 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ014419 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ014419 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:ZAK
中文名称:宫颈癌抑制蛋白4抗体
别 名;AZK; Cervical cancer suppressor gene 4
protein; HCCS 4; HCCS-4; HCCS4; Human cervical cancer suppressor gene 4
protein; Leucine zipper and sterile alpha motif containing kinase; Leucine
zipper- and sterile alpha motif-containing kinase; Mitogen activated protein
kinase kinase kinase MLT; Mitogen-activated protein kinase kinase kinase MLT;
Mixed lineage kinase 7; Mixed lineage kinase related kinase; Mixed lineage
kinase related kinase MRK beta; Mixed lineage kinase with a leucine zipper and
a sterile alpha motif; Mixed lineage kinase-related kinase; MLK 7; MLK like
mitogen activated protein triple kinase; MLK related kinase; MLK-like
mitogen-activated protein triple kinase; MLK-related kinase; MLK7; Mlklak; MLT;
MLTK; MLTK_HUMAN; MRK; Sterile alpha motif and leucine zipper containing kinase
AZK; Sterile alpha motif- and leucine zipper-containing kinase AZK; ZAK.
研究领域; 细胞生物 信号转导 激酶和磷酸酶
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Mouse, Rat, (predicted: Human, Chicken, Dog, Pig, Cow,
Horse, Rabbit, Sheep, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000
IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:200-800 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;91kDa
细胞定位;细胞核 细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human ZAK/HCCS4: 1-100/800
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Stress-activated
component of a protein kinase signal transduction cascade. Regulates the JNK
and p38 pathways. Pro-apoptotic. Role in regulation of S and G2 cell cycle
checkpoint by direct phosphorylation of CHEK2. Isoform 1, but not isoform 2,
causes cell shrinkage and disruption of actin stress fibers. Isoform 1 may have
role in neoplastic cell transformation and cancer development. Isoform 1, but
not isoform 2, phosphorylates histone H3 at 'Ser-28'.
Stress-activated component of a protein kinase signal transduction cascade. Regulates the JNK and p38 pathways. Pro-apoptotic. Role in regulation of S and G2 cell cycle checkpoint by direct phosphorylation of CHEK2. Isoform 1, but not isoform 2, causes cell shrinkage and disruption of actin stress fibers. Isoform 1 may have role in neoplastic cell transformation and cancer development. Isoform 1, but not isoform 2, phosphorylates histone H3 at 'Ser-28'.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
通用转录因子3C多肽5/TFIIIC90抗体 GTF3C5
膜蛋白相互作用蛋白GDE1 (MIR16) 抗体 MIR16
突触细胞粘附分子1抗体 Neuroligin 1
内质网退化蛋白2抗体 DERL2
RFTN2蛋白抗体 RFTN2
大鼠抗中性粒/中心体抗体(ACA)elisa分析检测试剂盒
S100钙结合蛋白P抗体 S100P
组织镁离子浓度酶反应光谱法定量检测试剂盒
胰岛素抗体 Insulin
猪甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)elisa分析检测试剂盒
5-羟色胺受体5A抗体 5HT5A receptor
山羊补体蛋白4(C4)elisa分析检测试剂盒
间皮素抗体 Mesothelin
氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量测试盒
甲基化样蛋白11抗体(N端) METTL11A
小鼠单核细胞趋化蛋白2(MCP2)elisa检测试剂盒
9号染色体开放阅读框37抗体 C9orf37
大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)elisa分析检测试剂盒
乙酰基转移酶10抗体 NAT10
TEM电镜冰冻切片组织化学AP酶联NBT/BCIP基础检测试剂盒
多巴胺受体相互作用蛋白1抗体 DRIP1
通用型禽鼻气管炎和肿头综合征(TRT)基因检测试剂盒
反义导向分子RGMB抗体 Repulsive Guidance Molecule B
小鼠CD30分子(CD30)elisa检测试剂盒
FP100蛋白抗体 FP100
大鼠线粒体解偶联蛋白2(UCP2)elisa检测试剂盒
GTP酶IMAP家族成员5抗体 GIMAP5
载玻片细胞PAR-2蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
宫颈癌抑制蛋白4抗体Ephrin-B2抗体 Ephrin-B2 研究领域; 心血管 神经生物学 信号转导 生长因子和 激酶和磷酸酶 通道蛋白 细胞膜受体 磷酸化转录接头蛋白EP300抗体 phospho-Ep300 (Ser89) 交叉反应;:
Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep, GuineaPig 蛋白质磷酸酶2调节亚基5C/PP2A-B56-γ抗体 PPP2R5C 研究领域;细胞生物 神经生物学 信号转导 激酶和磷酸酶 血管内㊆ڨ㊆