一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ006893 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ006893 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ006893 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:CEP57
中文名称:睾丸特异性蛋白57抗体
别 名;Centrosomal protein 57kDa; Centrosomal protein
of 57 kDa; Cep57; Cep57 protein; CEP57_HUMAN; FGF2 interacting protein;
FGF2-interacting protein; KIAA0092; MVA2; PIG8; Proliferation inducing protein
8; Testis specific protein 57; Testis-specific protein 57; Translokin; TSP57.
研究领域;细胞生物 发育生物学 干细胞 细胞分化
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;(predicted: Human, Mouse, Rat,
Dog, Horse, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000
IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;57kDa
细胞定位;细胞核 细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human CEP57: 51-150/500
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
CEP57 (centrosomal
protein 57kDa), also known as PIG8, TSP57 or Translokin, is a 500 amino acid
protein that localizes to both the nucleus and the cytoplasm, specifically
associating with microtubules at the centrosome. Expressed ubiquitously, CEP57
exists as a homodimer that functions to mediate the mitogenic activity and
nuclear translocation of FGF-2, an internalized growth factor, thereby
regulating FGF-2 signaling pathways. Additionally, CEP57 is thought to play a
role in spermatogenesis, possibly via the indirect regulation of gene
expression. Human CEP57 shares 88% sequence identity with its mouse and bovine
orthologs, suggesting a highly conserved role between species. Multiple
isoforms of CEP57 exist due to alternative splicing events.
Centrosomal protein which may be required for microtubule attachment to centrosomes. May act by forming ring-like structures around microtubules. Mediates nuclear translocation and mitogenic activity of the internalized growth factor FGF2.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
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睾丸核蛋白NUT抗体 NUT
磷酸化单丝氨酸蛋白激酶2抗体 phospho- LIM kinase 2 (Ser293)
核苷酸结合蛋白1抗体 NUBP1
Bloom综合征相关蛋白抗体 BLM
小鼠白介素4(IL-4)elisa检测试剂盒
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白介素-17C抗体 IL17C
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组织RCT激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
线粒体内钙结合天冬氨酸/谷氨酸载体蛋白抗体 SLC25A13
人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)elisa检测试剂盒
上皮钠通道β抗体 SCNN1B
大鼠激肽释放酶3(KLK3)elisa检测试剂盒
LYRM5抗体 LYRM5
犬Bcl-2相关X蛋白(BAX)elisa检测试剂盒
mRNA结合蛋白抗体 RAE1
10%Formalin固着液
肿瘤坏死因子受体相关蛋白3抗体 TRAF3
小鼠巨噬细胞移动因子(MIF)elisa检测试剂盒
轴丝动力蛋白7抗体 DNAH7
大鼠肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)elisa检测试剂盒
睾丸特异性蛋白57抗体FITC标记人CD51单克隆抗体 human CD51/FITC 抗体来源;Mouse 膜相关环指蛋白5抗体 5-Mar 研究领域;细胞生物 信号转导 细胞周期蛋白 通道蛋白 表观遗传学 泛素蛋白连接酶2E2抗体 UBE2E2 研究领域;细胞生物 信号转导 表观遗传学 乙酰肝素酶抗体 Heparanase 1 研究领域;