一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ008687 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ008687 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ008687 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:GRASP65
中文名称:高尔基体外周膜蛋白p65抗体
别 名;Golgi peripheral membrane protein p65; Golgi
phosphoprotein 5; Golgi reassembly and stacking protein 1; Golgi reassembly and
stacking protein 65 kDa; Golgi reassembly stacking protein 1 65kDa; Golgi reassembly
stacking protein 1; Golgi reassembly stacking protein of 65 kDa; Golgi
reassembly-stacking protein 1; Golgi reassembly-stacking protein of 65 kDa;
GOLPH 5; GOLPH5; Gorasp 1; Gorasp1; GORS1_HUMAN; GRASP 65; GRASP65; MGC118894;
MGC118897; P65; FLJ23443.
研究领域;细胞生物 细胞凋亡 细胞周期蛋白 细胞自噬
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Rat, (predicted: Mouse, Dog, Pig, Cow, Horse,
Rabbit, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;46kDa
细胞定位;细胞浆 细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human GRASP65: 1-100/440
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Stacking factor
involved in the postmitotic assembly of Golgi stacks from mitotic Golgi
fragments. Key structural protein required for the maintenance of the Golgi
apparatus integrity: its caspase-mediated cleavage is required for
fragmentation of the Golgi during apoptosis. Also mediates, via its interaction
with GM130, the docking of transport vesicles with the Golgi membranes.
Homodimer. Forms higher order oligomers under interphase but not mitotic conditions. Dimers of the protein on one membrane might be able to interact with dimers on another and so stack cisternae. Interacts with the C-terminus of GM130 under both mitotic and non-mitotic conditions. The interaction is critical for the correct targeting of both proteins to the cis-Golgi. The complex binds to the vesicle docking protein p115. Interacts with TMED2 and TMED3 (By similarity).
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
磷酸二酯酶1C抗体 PDE1C
干扰素α10抗体 IFNA10
磷酸化p21激活激酶1/2抗体 Phospho-PAK1 (Ser199 + Ser204) +
PAK2 (Ser192 + Ser197)
谷丙氨酸氨基转移酶1抗体 ALT1
ATP依赖的锌金属蛋白酶基因2蛋白抗体 LOC103444102
猴B病毒(BV)elisa分析检测试剂盒
B细胞白血病前体蛋白转录因子2抗体 PBX2
20 倍 SSC分子生物级浓缩缓冲溶液
溶质载体家族16成员9抗体 SLC16A9
荧光细胞流式仪完全间接检测试剂盒(含一抗和荧光二抗)
细胞纤毛内转运源蛋白172抗体 IFT172
小鼠蛋白C(Protein C)elisa检测试剂盒
γ-衔接蛋白相关蛋白1抗体 GGA1
人白介素5(IL-5)elisa分析检测试剂盒
α辅助因子44抗体 OBFC1
小鼠胸腺活化调节趋化因子(TAFA/CCL17)elisa检测试剂盒
酰基鞘氨醇脱酰酶2抗体 ASAH2
大鼠克拉拉细胞蛋白(CC16)elisa检测试剂盒
乳腺癌易感基因1抗体 BRCA1
细胞磷脂酶D2(Phospholipase
D2)活性荧光定量检测试剂盒
KLHDC9蛋白抗体 KLHDC9
大鼠β-防御素(β-DF)elisa检测试剂盒
MAMSTR蛋白抗体 MAMSTR
小鼠可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGF
R1/sFlt1)elisa检测试剂盒
中间丝相关蛋白抗体 Repetin
犬促卵泡素(FSH)elisa分析检测试剂盒
肿瘤异常甲基化蛋白1抗体 HIC1
细胞异柠檬酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒
高尔基体外周膜蛋白p65抗体PE标记人CD326 (Ep-CAM)单克隆抗体 human
CD326 (Ep-CAM)/PE 抗体来源;Mouse 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶PINK1抗体 PINK1 研究领域; 心血管 神经生物学 信号转导 激酶和磷酸酶 线粒体 极低密度脂蛋白受体抗体 VLDL Receptor 研究领域; 心血管 学 神经生物学 信号转导 3号染色体开放阅读框21抗体 C3orf21 研究领域; 细胞生物