一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ013537 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ013537 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ013537 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:TRPV6
中文名称:钙转运蛋白1抗体
别 名;ABP/ZF; ABPZF; Alu binding protein with zinc
finger domain; Calcium channel CaT1; Calcium transport protein 1; CaT L; CaT
Like; CaT-L; CaT-like; CaT1; ecac; ECaC2; Epithelial apical membrane calcium transporter/channel
CaT1; Epithelial calcium channel 2; Epithelial calcium channel; HSA277909;
LP6728; MGC162545; NUDC; Transient receptor potential cation channel subfamily
V member 6; TrpV6; TRPV6_HUMAN; ZFAB.
研究领域;信号转导
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应; Human, Mouse, (predicted: Rat, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=3ug/Test
ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;83kDa
细胞定位;细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human TRPV6: 4-100/725
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
This gene encodes a
member of the vanilloid family of transient receptor potential (TRP) calcium
channel proteins. Proteins in this TRP family have an N-terminal ankyrin repeat
domain, which is required for channel assembly and regulation. [provided by
RefSeq, Nov 2011].
Calcium selective cation channel probably involved in Ca(2+) uptake in various tissues, including Ca(2+) reabsorption in intestine. The channel is activated by low internal calcium level, probably including intracellular calcium store depletion, and the current exhibits an inward rectification. Inactivation includes both, a rapid Ca(2+)-dependent and a slower Ca(2+)-calmodulin-dependent mechanism, the latter may be regulated by phosphorylation. In vitro, is slowly inhibited by Mg(2+) in a voltage-independent manner. Heteromeric assembly with TRPV5 seems to modify channel properties. TRPV5-TRPV6 heteromultimeric concatemers exhibit voltage-dependent gating (By similarity).
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
甲基样蛋白15抗体
视网膜母细胞瘤样蛋白p107抗体 Anti-p107
METTL15/METT5D1
细胞生长抑制基因1蛋白抗体 Anti-TPP1/CLN2
1号染色体开放阅读框162抗体
Mouse IgG / PE-Cy5
C1orf162
HECTD4蛋白抗体
原肌球蛋白4抗体
PE-Cy5标记小鼠IgG(型对照)
跨膜蛋白16C抗体 Anti-TMEM16C/Anoctamin 3
HECTD4
血管内皮生长因子抗体 Anti-VEGF
大鼠核因子κB(NF-κB)elisa分析检测试剂盒
谷氨酸受体2D抗体 Anti-NR2D/NMDAR2D
兔干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)elisa分析检测试剂盒
反义导向分子RGMB抗体 Anti-RGMB/Repulsive
Guidance Molecule B
CXCL10ELISAkit
TPM4
NF-κB ELISA Kit
凋亡相关蛋白激酶样蛋白1抗体
黑色素瘤分化相关蛋白5抗体
DAPL1
IFIH1
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Sgk3抗体 Anti-SGK3
遗传性失明相关蛋白AIPL1抗体
水稻白叶枯病菌Os05g0477200蛋白抗体 Anti-Os05g0477200 protein
AIPL1
钙转运蛋白1抗体酸性成纤维细胞生长因子抗体 FGF1 研究领域; 细胞生物 生长因子和 RAS家族关联结构域蛋白8抗体 RASSF8 研究领域; 细胞生物 信号转导 7号染色体开放阅读框45抗体 C7orf45 研究领域;细胞生物 角蛋白相关蛋白KAP8.1抗体 KAP8.1 研究领域;细胞生物 信号转导