一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ006071 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ006071 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ006071 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Cadherin 10
中文名称:钙粘附分子10抗体
别 名;cadherin10; cadherin-10; Cadherin 10 (T2
cadherin); Cadherin 10 type 2 (T2 cadherin); Cadherin 10 type 2; Cadherin10; T2
cadherin; CAD10_HUMAN.
研究领域;神经生物学 信号转导 细胞粘附分子 细胞骨架 细胞膜蛋白
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;(predicted: Human, Mouse, Rat,
Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;82kDa
细胞定位;细胞膜
性
状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human Cadherin 10: 31-130/788 <Extracellular>
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
The cadherins are a family of Ca2+-dependent adhesion molecules that function to mediate cell-cell binding critical to the maintenance of structure and morphogenesis. Cadherins each contain a large extracellular domain at the N-terminus, which is characterized by a series of five homologous repeats, the most distal of which is thought to be responsible for binding specificity. T2-cadherin, also known as cadherin-10 or CDH10, is a 788 amino acid single-pass type I membrane protein that belongs to the cadherin family and contains five cadherin domains. Expressed predominately in brain, but also found in prostate and both and fetal kidney, T2-cadherin functions as a calcium-dependent cell adhesion protein that is thought to be involved in the maintenance of synaptic adhesions, axon outgrowth and guidance.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
MED30蛋白抗体
嘌呤ATP受体抗体 Anti-P2Y2
MED30
酪氨酸酶抗体 Anti-Tyrosinase
1号染色体开放阅读框110抗体
Mouse IgG / Cy5.5
C1orf110
人乙肝病毒pre S1蛋白/HBV pre S1 protein抗体
TNRC6C
Cy5.5标记小鼠IgG(型对照)
癌/睾丸抗原113抗体 Anti-Tex14/CT113
HBV pre S1 protein
WD重复膜蛋白61抗体 Anti-WDR61
大鼠活化素A(ACV-A)elisa分析检测试剂盒
EGR1结合蛋白2抗体 Anti-NAB2/MADER
小鼠1,25二羟基维生素D3(1,25 DHVD3)elisa分析检测试剂盒
转录调控因子RFX4抗体 Anti-RFX4
25DHVD3)ELISAkit
TNRC6C
ACV-A ELISA Kit
CYLC2蛋白抗体
HTF9C蛋白抗体
CYLC2
HTF9C
大肠杆菌志贺样Ⅱ型突变体(O139菌型)抗体 Anti-Shiga-like toxin IIe
variant subunit A
Allgrove综合征相关蛋白抗体
丘脑分泌素受体抗体(食欲素受体) Anti-CD200R/Orexin receptor
Adracalin
钙粘附分子10抗体通用转录因子3A GTF3A 研究领域;转录调节因子 锌指蛋白 表观遗传学 SARM蛋白抗体 SARM1 研究领域;细胞生物 信号转导 生长因子和 细胞 AF680标记的KB抑制蛋白激酶ε抗体 IKB epsilon, Alexa Flour 680
conjugated 研究领域;细胞生物 信号转导 转录调节因子
聚磷酸肌醇磷酸酶5B抗体 INPP5B 研究领域;细胞生物 信号转导