一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ005969 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ005969 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ005969 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Calponin 1 + 2 + 3
中文名称:钙结合蛋白Calponin抗体
别 名;smooth muscle; Basic calponin; Calponin 1;
Calponin 2; Calponin 3; Calponin1; Calponin2; Calponin3; Calponin-1;
Calponin-2; Calponin-3; Calponin 1 basic smooth muscle; Calponin H1; Calponin
H1 smooth muscle; Calponins basic; CNN 1; Cnn1; CNN2_HUMAN; Sm Calp; SMCC.
研究领域;心血管 细胞生物 信号转导 干细胞 结合蛋白 细胞骨架
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Rat, (predicted: Human, Mouse, Dog, Pig, Cow,
Horse, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000
IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1μg/Test
IF=1:50-200 IEM=1:20-200 ICA=1:20-200 ChIP=1:20-200 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;34kDa
细胞定位;细胞浆 细胞膜 细胞外基质 分泌型蛋白
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human Calponin 1/2/3: 101-200/309
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Calponin regulates
smooth muscle cell contraction and is a marker of smooth muscle cell
differentiation. Calponin, an Actin- and Tropomyosin-binding protein, is
characterized as an inhibitory factor of smooth-muscle actomyosin activity.
Calponin is implicated in the regulation of smooth muscle contraction through
its interaction with F-Actin and inhibition of the Actin-activated MgATPase
activity of phosphorylated myosin. Both properties are lost following
phosphorylation (primarily at Serine 175) by protein kinase C or
calmodulin-dependent protein kinase II. The three forms of Calponin, Calponin 1
(basic Calponin), Calponin 2 (neutral Calponin) and Calponin 3 (acidic
Calponin) are found in smooth muscle tissue. Additionally, Calponin 2 is found
in heart muscle tissue and Calponin 3 is found in the brain.
Thin filament-associated protein that is implicated in the regulation and modulation of smooth muscle contraction. It is capable of binding to actin, calmodulin, troponin C and tropomyosin. The interaction of calponin with actin inhibits the actomyosin Mg-ATPase activity.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
KIAA1751蛋白抗体
乳腺癌易感基因相关蛋白2 Anti-PALB2
KIAA1751
RNA聚合酶I抗体 Anti-UBF1/RNA polymerase I
抗1A抗体
Mouse Anti-Rat IgG
H&L ascites
AVPR1A
锌指蛋白426抗体
S100A2抗体
小鼠抗大鼠IgG H&L腹水
小鼠白细胞介素1α(IL-1α/IL-1F1)elisa检测试剂盒
ZNF426
人1,25二羟基维生素D3(1,25 DHVD3)elisa检测试剂盒
马环磷酸鸟苷(cGMP)elisa分析检测试剂盒
载玻片细胞βCOLLAGEN II蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
小鼠丙酮酸激酶(PK)elisa分析检测试剂盒
大鼠5羟二十碳四烯酸(5-HETE)elisa检测试剂盒
PKELISAKit
S100 alpha 2
cGMP ELISA Kit
常染色体隐性遗传肝硬化1A抗体
鱼肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa分析检测试剂盒
Cirhin
TNF-α ELISA KIT
细胞生长因子激活抑制蛋白2抗体 Anti-SPINT2/HAI2/HGFA
Inhibitor 2
人雌二醇受体(ER)elisa分析检测试剂盒
过氧化酶活化增生受体γ抗体 Anti-PPAR Gamma
ERELISAKit
钙结合蛋白Calponin抗体脂蛋白脂酶抗体 Lipoprotein lipase 研究领域; 心血管 细胞生物 信号转导 干细胞 血管内皮细胞 新陈代谢 高迁移率族蛋白20A抗体 HMG20A 研究领域;细胞生物 转录调节因子 表观遗传学 MEX3A蛋白抗体 MEX3A 研究领域;细胞生物 信号转导 结合蛋白 表观遗传学 软骨衍生形态发生蛋白1/GDF
5抗体 CDMP1 研究领域;心血管 细胞生物 信号转导 干细胞 生长因子和 转录调节因子