一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ004816 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ004816 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ004816 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:KCNMA1/BK channel
中文名称:钙激活钾通道蛋白 α 1抗体
别 名;Maxi Potassium channel alpha; bA205K10.1; BK
channel; BKCa channels; BKCA alpha; BKCA alpha subunit; BKTM; Calcium activated
potassium channel subfamily M subunit alpha 1; Calcium activated potassium
channel subunit alpha 1; DKFZp686K1437; Drosophila slowpoke like; hSlo;
K(VCA)alpha; KCa1.1; KCNMA 1; KCNMA; KCNMA1; Large conductance calcium
activated potassium channel subfamily M alpha member 1; Maxi K; Maxi K channel;
MaxiK; Potassium large conductance calcium activated channel subfamily M alpha
member 1; SAKCA; Slo 1; SLO alpha; SLO; Slo homolog; Slo1; Slowpoke homolog;
Stretch activated Kca channel; KCMA1_HUMAN.
研究领域;通道蛋白
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Rat, (predicted: Mouse, Dog, Pig, Cow, Horse,
Rabbit, Sheep, )
产品应用;IHC-P=1:100-500
IHC-F=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;137kDa
细胞定位;细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human BK channel: 1151-1236/1236 <Cytoplasmic>
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
MaxiK channels are large conductance, voltage and calcium-sensitive potassium channels which are fundamental to the control of smooth muscle tone and neuronal excitability. MaxiK channels can be formed by 2 subunits: the pore-forming alpha subunit, which is the product of this gene, and the modulatory beta subunit. Intracellular calcium regulates the physical association between the alpha and beta subunits. Alternatively spliced transcript variants encoding different isoforms have been identified. [provided by RefSeq, Jul 2008].
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
钾离子通道蛋白家族成员4抗体
泛酸激酶3抗体 Anti-PANK3
KCNE4
泛素化组蛋白H2AX抗体 Anti-Histone H2A.X
(Ubiquityl Lys119)
真核翻译起始因子2C4抗体
Rabbit Anti-Mouse
IgG H&L / Gold
Argonaute 4
锌指蛋白ZIC5抗体
环指蛋白131抗体
胶体金标记的兔抗小鼠IgG H&L
大鼠血小板衍生生长因子B(PDGF-B)elisa检测试剂盒
ZIC5
MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒500T
绵羊弹性蛋白酶2,中性粒细胞(ELA2)elisa分析检测试剂盒
小鼠opiorphin elisa分析检测试剂盒
小鼠的牛血清白蛋白残留检测elisa分析检测试剂盒
载玻片细胞TNF ALPHA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Mouserudimentalbovineserumalbumincheck-upELISAKit
RNF131
neutrophil(ELA2)ELISA
kit
补体因子H相关蛋白4抗体
甲型流感H5N1(Avian Flu)HA elisa分析检测试剂盒
CFHL4
Influenza A
H5N1(Avian Flu)HA ELISA Kit
磷酸化神经生长相关蛋白SCG10抗体 Anti-phospho-STMN2/SCG10 (Ser50)
人弹性蛋白酶(Elastase)elisa分析检测试剂盒
血小板白细胞C激酶底物源结构域M2抗体 Anti-PLEKHM2/SKIP
HumanElastaseELISAKit
钙激活钾通道蛋白 α 1抗体组氨酸氨酶HAL抗体 Histidase 研究领域;细胞生物 信号转导 环指蛋白169抗体 RNF169 研究领域;细胞生物 PE标记人TCR α/β单克隆抗体 human TCR α/β/PE 抗体来源;Mouse 丝氨酸蛋白酶抑制剂B11抗体 SERPINB11 研究领域;细胞生物 激酶和磷酸酶