一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ007868 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ007868 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ007868 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Furin
中文名称:弗林蛋白酶抗体
别 名;FURIN_HUMAN; Furin; EC:3.4.21.75; FURIN; FUR;
PACE; PCSK3; Dibasic-processing enzyme; Paired basic amino acid
residue-cleaving enzyme (PACE);
研究领域;细胞生物 信号转导 新陈代谢 泛素
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应; Mouse, (predicted: Human, Rat, Chicken, Dog, Pig,
Cow, Horse, Rabbit, Sheep, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500
IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;74kDa
细胞定位;细胞浆 细胞膜 细胞外基质
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human Furin: 401-500/794
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Furin is a
calcium-dependent serine endoprotease that belongs to the subtilisin-like
proprotein convertase family. The members of this family process latent
precursor proteins into their biologically active products. Furin cleaves at
paired basic amino acid processing sites within proparathyroid hormone,
transforming growth factor β 1
precursor, proalbumin, pro-β-secretase, membrane type-1
matrix metalloproteinase, β subunit of pro-nerve growth
factor and von Willebrand factor. Furin can directly cleave proMMP-2 within the
ttrans-Golgi network leading to an inactive form of matrix metalloproteinase-2
(MMP-2). Furin is synthesized as an inactive zymogen that may minimize the
occurrence of premature enzymatic activity that would lead to alternative
protein activation or degradation. The inhibitory mechanism is based on the
presence of an inactivating prosegment at the NH2 terminal of the Furin. After
initial autocatalytic cleavage, the prosegment remains tightly associated until
it reaches the trans-Golgi network where the dissociation of the prosegment and
activation of furin occurs.
Furin is likely to represent the ubiquitous endoprotease activity within constitutive secretory pathways and capable of cleavage at the RX(K/R)R consensus motif.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
大象促卵泡素(FSH)elisa分析检测试剂盒
牙齿发育相关蛋白Osr2抗体 Anti-OSR2
FSH ELISA Kit
滑膜细胞凋亡抑制物1抗体 Anti-SYVN1/HRD1
人大肠癌专一抗原3(CCSA-3)elisa分析检测试剂盒
Rabbit Anti-Bovine
IgM / PE
CCSA-3ELISAkit
大鼠血清型IgA抗体
NADSYN1蛋白抗体
PE标记的兔抗牛IgM
大鼠可溶性P选择素(sP-selectin)elisa检测试剂盒
rat IgA
肉类食物样品处理试剂盒
人SAA/LDL复合物 elisa分析检测试剂盒
山羊谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)elisa分析检测试剂盒
小鼠糖皮质受体α(GR-α)elisa分析检测试剂盒
虫卵细胞活力和死亡细胞流式定量检测试剂盒
GR-αELISAKit
NAD Synthetase
HumanSAA/LDLComplexELISAkit
补体C4b-A蛋白抗体
大鼠促性腺释放(GnRH)elisa分析检测试剂盒
C4b-A
GnRH ELISA Kit
瞬时受体电位蛋白12抗体 Anti-TRPV4/TRP12
人胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)elisa分析检测试剂盒
磷酸化磷酯酶Cγ1抗体 Anti-Phospho-PLC gamma
1/PLCG1(Tyr775)
HumanGDNFELISAKIT
弗林蛋白酶抗体STAC1蛋白抗体 STAC 研究领域;神经生物学 信号转导 微小染色体维持缺陷蛋白9抗体 MCM9 研究领域;细胞生物 表观遗传学 跨膜蛋白166抗体 TMEM166 研究领域; 细胞生物 细胞凋亡 APC标记人CD274 (B7-H1, PD-L1)单克隆抗体 human CD274
(B7-H1, PD-L1)/APC 抗体来源;Mouse