一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ013298 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ013298 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ013298 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Sumo2+3
中文名称:泛素样蛋白Sumo2/3抗体
别 名;Sumo 2 + Sumo 3; Sumo2/3; HSMT3; MGC117191;
OTTHUMP00000115275; OTTHUMP00000115276; OTTHUMP00000115277; Sentrin 2; Small
ubiquitin like modifier 2; Small ubiquitin like modifier protein 3; Small
ubiquitin related modifier 2; Small ubiquitin related modifier 3; SMT3 A; SMT3
B; SMT3 H1; SMT3 H2; SMT3 homolog 1; SMT3 homolog 2; SMT3 homolog; SMT3
suppressor of mif two 3 homolog 1; SMT3 suppressor of mif two 3 homolog 2 (S.
cerevisiae); SMT3 suppressor of mif two 3 homolog 2; SMT3 suppressor of mif two
3 homolog 3 (S. cerevisiae); SMT3 suppressor of mif two 3 homolog 3; SMT3A;
SMT3B; SMT3H1; SMT3H2; Sumo 2; Sumo 3; Sumo2; Sumo3; Suppressor of mif two 3
homolog 2; Suppressor of mif two 3 homolog 3; Ubiquitin like protein SMT3A;
Ubiquitin like protein SMT3B; SUMO2_HUMAN; SUMO3_HUMAN.
研究领域;细胞生物 神经生物学 细胞周期蛋白 泛素
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应; Human, (predicted: Mouse, Rat, Chicken, Cow, Horse,
Rabbit, Zebrafish, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=3ug/test
ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;10.9+10.5kDa
细胞定位;细胞核
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human Sumo2+Sumo3: 21-95/95
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
The small
ubiquitin-related modifier (SUMO) proteins, which include SUMO-1, SUMO-2 and
SUMO-3, belong to the ubiquitin-like protein family. Like ubiquitin, the SUMO
proteins are synthesized as precursor proteins that undergo processing before
conjugation to target proteins. Also, both utilize the E1, E2, and E3 cascade
enzymes for conjugation. However, SUMO and ubiquitin differ with respect to
targeting. Ubiquitination predominantly targets proteins for degradation,
whereas sumoylation targets proteins to a variety of cellular processing,
including nuclear transport, transcriptional regulation, apoptosis and protein
stability. The unconjugated SUMO-1, SUMO-2 and SUMO-3 proteins localize to the
nuclear membrane, nuclear bodies and cytoplasm, respectively. SUMO-1 utilizes
Ubc9 for conjugation to several target proteins, which include IkBa, MDM2, p53,
PML and Ran GAP1. SUMO-2 and SUMO-3 contribute to a greater percentage of
protein modification than does SUMO-1, and unlike SUMO-1, they can form
polymeric chains. In addition, SUMO-3 regulates b-Amyloid generation and may be
critical in the onset or progression of Alzheimer’s disease.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
自噬相关蛋白4D抗体 ATG4D
锌指蛋白186抗体 ZNF186
组织蛋白酶K抗体 Cathepsin K
新型抑癌蛋白Nischarin抗体 NISCH
核相关精子蛋白N2抗体 SPANXN2
总胆固醇含量测定试剂盒
滑膜肉瘤X断点蛋白5抗体 SSX5
人血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)elisa检测试剂盒
E3泛素连接酶蛋白NEURL1B抗体 NEURL1B
大鼠糖蛋白130(gp130)elisa检测试剂盒
P5C还原酶3抗体 PYCRL
植酸待测样品处理试剂盒
肾脏和脑蛋白抗体 KIBRA
小鼠PR基因甲基化检测试剂盒
神经调节蛋白4抗体 NRG4
大鼠Bcl2/腺病毒E1B相互作用蛋白3(BNIP3)elisa检测试剂盒
PE-Cy7标记人CD36单克隆抗体 human CD36/PE-Cy7
小鼠膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)elisa检测试剂盒
ETS1相关蛋白2抗体 TDP2
人Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)elisa检测试剂盒
磷酸化前病毒整合位点蛋白1抗体 Phospho-PIM1 (Tyr309)
小鼠CXC趋化因子配体1(CXCL1)elisa检测试剂盒免费代测
磷酸化细胞核因子p100基因结合核因子抗体 phospho-NFKB2 (Ser870)
抗体蛋白质A标记制备试剂盒
超氧化物歧化酶1(铜/锌过氧化物歧化酶SOD)抗体 SOD1
FIS-1蛋白表达检测试剂盒
催产素抗体 Oxytocin
鸡HSP90抗体(IgG)elisa检测试剂盒
泛素样蛋白Sumo2/3抗体拟南芥IKI3抗体 ELP1 产品类型植物抗体 G蛋白偶联受体125抗体 GPR125 研究领域;神经生物学 信号转导 细胞膜受体 G蛋白偶联受体 G蛋白信号 原钙粘蛋白γA9抗体 PCDHGA9 研究领域;神经生物学 信号转导 细胞粘附分子 细胞骨架 细胞膜蛋白 钙激活钾通道蛋白KCNT2抗体 KCNT2 研究领域;神经生物学 通道蛋白 细胞膜受体