一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ007296 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ007296 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ007296 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Dppa4
中文名称:多能发育相关基因4抗体
别 名;2410091M23Rik; Developmental pluripotency
associated 4; Developmental pluripotency associated protein 4; Developmental
pluripotency-associated protein 4; Dppa 4; DPPA4; DPPA4_HUMAN; FLJ10713.
研究领域;细胞生物 干细胞 转录调节因子
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;(predicted: Human, Mouse, Rat,
)
产品应用;ELISA=1:5000-10000
IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;34kDa
细胞定位;细胞核
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human Dppa4: 51-150/304
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
DPPA4 (developmental
pluripotency associated 4) is a 304 amino acid protein that localizes to the
nucleus and is thought to be involved in the maintenance of cell
pluripotentiality during embryogenesis. The gene encoding DPPA4 maps to human
chromosome 3, which houses over 1,100 genes, including a chemokine receptor
(CKR) gene cluster and a variety of human cancer-related gene loci. Key tumor
suppressing genes on chromosome 3 include those that encode the apoptosis
mediator RASSF1, the cell migration regulator HYAL1 and the angiogenesis
suppressor SEMA3B. Marfan Syndrome, porphyria, von Hippel-Lindau syndrome,
osteogenesis imperfecta and Charcot-Marie-Tooth Disease are a few of the
numerous genetic diseases associated with chromosome 3.
May be involved in the maintenance of active epigenetic status of target genes (By similarity). May inhibit differentiation of embryonic cells into a primitive ectoderm lineage.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
芳香烃受体核转录蛋白样1抗体 BMAL1
SAMD7蛋白抗体 SAMD7
附睾特异蛋白9抗体 LCN9
THAP11单克隆抗体 THAP11
胰岛因子ICRF抗体 REG1A
鱼类促性腺释放(GnRH)elisa分析检测试剂盒
异质核糖核蛋白hnRNPA2抗体 hnRNP A2B1
人肥大细胞类胰凝乳蛋白酶elisa检测试剂盒
晶状体蛋白ζ抗体 CRYZ
大鼠皮敌菌素(DCD)elisa检测试剂盒
内质网蛋白29抗体 ERp29
(包括抗体)
G蛋白家族RAB13蛋白抗体 RAB13
细胞CREB蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒
GAGE12H蛋白抗体 GAGE12H
蛋白提取液(Western)100ml
胚胎干细胞相关转录因子1抗体 Ecat1
小鼠肌细胞**素(MYOG)elisa检测试剂盒
卷曲螺旋结构域蛋白17抗体 CCDC17
马结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)elisa分析检测试剂盒
9号染色体开放阅读框79抗体 C9orf79
蜥蜴雄烯二酮(ASD)elisa检测试剂盒
AF680标记的多巴胺转运蛋白DAT抗体 Dopamine
Transporter, Alexa Fluor 680 conjugated
通用型野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris;Xc)
土霉素抗体 Oxytetracycline
β-半乳糖苷酶活性高质敏感比色法定量检测试剂盒
微小染色体维持缺陷蛋白3抗体 MCM3
大鼠组胺N-甲基转移酶(HNMT)elisa检测试剂盒免费代测
多能发育相关基因4抗体G蛋白偶联受体MRGX1抗体 MRGX1 研究领域;细胞生物 信号转导 转录调节因子 G蛋白偶联受体 前列腺素氧化环化酶1抗体 Cyclooxygenase 1 研究领域; 心血管 学 信号转导 合成与降解 甘丙肽受体2抗体 GALR2 研究领域; 细胞生物 神经生物学 信号转导 通道蛋白 细胞膜受体 G蛋白偶联受体 G蛋白信号 整合素αE重组兔单克隆抗体 ITGAE/CD103 研究领域;细胞生物 细胞粘附分子 细胞分化