一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ012623 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ012623 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ012623 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Polycystin 1
中文名称:多囊肾蛋白1抗体
别 名;Autosomal dominant polycystic kidney disease
protein 1; PBP; PKD; PKD1; Polycystic Kidney Disease 1; Polycystin 1 Precursor;
PKD1; Pc-1; TRPP1; PKD1_HUMAN.
研究领域;细胞生物 发育生物学
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, (predicted: Mouse, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000
IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1μg/Test
ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;460kDa
细胞定位;细胞膜
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human Polycystin 1: 131-230/4303 <Extracellular>
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
This gene encodes a
member of the polycystin protein family. The encoded glycoprotein contains a
large N-terminal extracellular region, multiple transmembrane domains and a
cytoplasmic C-tail. It is an integral membrane protein that functions as a
regulator of calcium permeable cation channels and intracellular calcium
homoeostasis. It is also involved in cell-cell/matrix interactions and may
modulate G-protein-coupled signal-transduction pathways. It plays a role in
renal tubular development, and mutations in this gene cause autosomal dominant
polycystic kidney disease type 1 (ADPKD1). ADPKD1 is characterized by the
growth of fluid-filled cysts that replace normal renal tissue and result in
end-stage renal failure. Splice variants encoding different isoforms have been
noted for this gene. Also, six pseudogenes, closely linked in a known
duplicated region on chromosome 16p, have been described. [provided by RefSeq].
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
猪霍乱沙门氏菌抗体
磷酸化A-Raf抗体 Anti-Phospho-A
Raf(Tyr301/302)
pig cholerae
salmonella
互养蛋白3抗体 Anti-Syntrophin-3
热休克蛋白70蛋白12B抗体
IP3 ELISA kit
HSPA12B
人分泌型球蛋白A(SIgA)elisa分析检测试剂盒
PE-CY5标记的兔抗豚鼠IgG H&L
大鼠1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)elisa分析检测试剂盒
血小板反应蛋白2/凝血酶敏感蛋白2抗体 Anti-Thrombospondin 2
SIgAELISAKit
鲨烯环氧酶抗体 Anti-Squalene Epoxidase
石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒100T
cGMP依赖性蛋白激酶1抗体 Anti-Prkg1/cGKI
支原体蛋白提取试剂盒100T
蛋白酶体PSMα6抗体 Anti-Proteasome 20S alpha
6
大鼠糖原合成酶激酶3α(GSK3A)elisa检测试剂盒
Rabbit Anti-Guinea
Pig IgG H&L / PE-Cy5
植物组织质膜(plasma membrane)分离试剂盒
磷酸化组蛋白H1,4样蛋白抗体
MGAT4C蛋白抗体
phospho-Histone
H1.4 (Ser27)
MGAT4C
宫颈癌抑癌蛋白5/锌指蛋白434抗体 Anti-ZNF434
锌离子结合蛋白DTX2抗体
谷氨酸受体NMDAζ2抗体 Anti-NMDA epsilon 2
DTX2
多囊肾蛋白1抗体KB抑制蛋白激酶α/β抗体 IKK Alpha + IKK
beta 研究领域; 细胞生物 信号转导 转录调节因子 激酶和磷酸酶 热休克蛋白J1抗体 HSJ1 研究领域;细胞生物 神经生物学 细胞分化 谷氨酸脱羧酶-65单克隆抗体 GAD65 糖尿病 相关胰蛋白酶抑制剂1抗体 SPINK1 研究领域; 细胞生物 激酶和磷酸酶