一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ009076 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ009076 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ009076 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:HEAB
中文名称:多聚腺苷酸因子Clp1蛋白抗体
别 名;ATP/GTP binding protein; CLP 1; clp1; CLP1
cleavage and polyadenylation factor I subunit homolog; CLP1, cleavage and
polyadenylation factor I subunit, homolog (S. cerevisiae); CLP1, yeast, homolog
of; CLP1_HUMAN; hClp1; Homolog of yeast CFIA subunit Clp1p; Polynucleotide
kinase Clp1; Pre mRNA cleavage complex II protein Clp1; Pre-mRNA cleavage
complex II protein Clp1.
研究领域;细胞生物 染色质和核信号 表观遗传学
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;(predicted: Human, Mouse, Rat,
Cow, Horse, Rabbit, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;48kDa
细胞定位;细胞核
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human HEAB: 1-100/425
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
HEAB is a 425 amino
acid nuclear protein that belongs to the Clp1 family. Utilizing magnesium,
manganese or nickel as cofactors, HEAB participates in the phosphorylation of
the 5'-hydroxyl groups of double- and single- stranded RNA and DNA. HEAB is a
member of the tRNA splicing endonuclease complex, in conjunction with TSEN2, TSEN15,
TSEN34 and TSEN54, and is also a member of the pre-mRNA cleavage complex II.
The gene encoding HEAB maps to human chromosome 11q12.1 and mouse chromosome 2
D; mutations to this gene may lead to a reduced pre-mRNA cleavage activity.
HEAB exists as two isoforms due to alternative splicing events.
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
丙酮酸脱氢酶E1β亚基抗体
Ras相关GTP结合蛋白抗体 Anti-RPH3AL
PHE1B/PDH-E1 beta
精子卵子结合**碱性螺旋蛋白抗体 Anti-Sohlh1
HRASLS5蛋白抗体
25 HVD3 ELISA Kit
HRASLS5
人钙调结合蛋白(CALD)elisa分析检测试剂盒
罗丹明标记的兔抗大鼠IgM
大鼠25羟基维生素D3(25
HVD3)elisa分析检测试剂盒
跨膜蛋白49抗体 Anti-TMEM49
CALDELISAKit
丝氨酸/苏氨酸/酪氨酸激酶STYK1抗体 Anti-Styk1
人Salusin Beta(Salusin β)elisa检测试剂盒免费代测
造血干细胞抗原CD133相关蛋白抗体 Anti-Prominin 2
小鼠可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)elisa检测试剂盒
三磷酸腺苷受体P2X5b抗体 Anti-P2X5b
大鼠多巴胺(DA)elisa分析检测试剂盒
Rabbit Anti-Rat
IgM / RBITC
组织血红素氧合酶-1(HEME OXYGENASE-1)活性比色法定量检测试剂盒
磷酸化Ephrin B1抗体
中胚层分化蛋白2抗体
phospho-Ephrin B1
(Tyr317)
MESDC2
锌指蛋白312抗体 Anti-ZNF312
DNAJC4蛋白抗体
磷酸化神经细胞正五聚体1抗体 Anti-phospho-NPTX1(Tyr344)
DNAJC4
多聚腺苷酸因子Clp1蛋白抗体LRRC19蛋白抗体 LRRC19 研究领域;细胞生物 信号转导 转录调节因子 表观遗传学 溶质载体家族蛋白25成员A26抗体 SLC25A26 研究领域;细胞生物 信号转导 含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族10抗体 ASB10 研究领域;细胞生物 转录共激活因子TAZ抗体 TAZ 研究领域;细胞生物 信号转导 细胞凋亡 细胞周期蛋白 转录调节因子 表观遗传学