一抗操作步骤：
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭：这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合，从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点，以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉，缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1～2小时，特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜，以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育：在一抗孵育之前，需要参考一抗的说明书，按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后，立即加入稀释好的一抗，室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1～2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳，可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗，加入Western洗涤液，在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟，共洗涤3次。如果结果背景较高，可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤：洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合，洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液，其中的Tween20有助于去除非特异性的结合，减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定，建议清洗3-5次，每次5分钟。
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货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
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BJ011952 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
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BJ011952 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
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BJ011952 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性：
英文名称：PMFBP1
中文名称：多胺调制因子结合蛋白1抗体
别 名；PMF 1 binding protein; PMF-1-binding protein;
PMFBP_HUMAN; Pmfbp1; Polyamine modulated factor 1 binding protein 1;
Polyamine-modulated factor 1-binding protein 1.
研究领域；细胞生物 发育生物学 干细胞
抗体来源；Rabbit
克隆类型；Polyclonal
交叉反应； Human, (predicted: Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse,
Sheep, )
产品应用；WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 （石蜡切片需做抗原修复）
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量；119kDa
细胞定位；细胞浆
性 状；Liquid
浓 度；1mg/ml
免 疫 原；KLH conjugated synthetic
peptide derived from Human PMFBP1: 201-330/1022
亚 型；IgG
纯化方法；affinity purified by Protein A
缓 冲 液；0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项；This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍：
PMF-1 is a 205 amino
acid protein involved in kinetochore formation. Localized to the nucleus, PMF-1
contains a coiled-coil domain which interacts with the leucine-zipper domain of
Nrf2. This interaction regulates the transcription of SSAT, a regulatory enzyme
for polyamine catabolism. PMF-1 is also a component of the MIS12 complex, which
is required for kinetochore formation and chromosomal alignment and
segregation. PMF-1 is expressed at highest levels in skeletal muscle and heart,
with moderate expression in liver and kidney. PMFBP1 (Polyamine-modulated
factor 1-binding protein 1) is a 1022 amino acid protein that binds PMF-1 and
may be involved in general organization of the cytoskeleton. Due to evidence
that PMFBP1 may play a role in sperm tail morphology, it may therefore affect
fertility. There are three isoforms of PMFBP1 that are produced as a result of
alternative splicing events.
May play a role in sperm morphology especially the sperm tail and consequently affect fertility. May also be involved in the general organization of cellular cytoskeleton.Target information above from: UniProt accession Q8TBY8 The UniProt Consortium The Universal Protein Resource (UniProt) in 2010 Nucleic Acids Res. 38:D142-D148 (2010).
抗体注意事项：
确定抗体的名字和特性：注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息，这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型：了解你的实验类型（如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS），因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型，并不意味着该抗体不适用于该实验，只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属：确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等，因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质：了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体，特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时，这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择：单克隆抗体特异性强但亲和力相对小，而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性：原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体，避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择：封闭液的选择应根据抗体说明书进行，常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点，降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项：使用干净的孵育盒子，避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白，可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
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2
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