一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ011657 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ011657 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ011657 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:NF-L
中文名称:低分子量神经丝蛋白抗体
别 名;Neurofilament L; Neurofilament 68;
Neurofilament triplet L; 70 kD Neurofilament Light; 68kDa neurofilament
protein; CMT 1F; CMT 2E; CMT1F; CMT2E; FLJ53642; Light molecular weight
neurofilament protein; NEFL; Neurofilament light; Neurofilament light
polypeptide 68kDa; Neurofilament light polypeptide; Neurofilament protein,
light chain; Neurofilament subunit NF L; Neurofilament triplet L protein; NF
68; NF L; NF68; NFL; NFL_HUMAN.
研究领域;细胞生物 神经生物学 信号转导
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;Human, Mouse, Rat,
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 Flow-Cyt=1ug/Test
IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;68kDa
细胞定位;细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human NH-L intermedial: 301-400/543
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Neurofilament light
polypeptide also called NF-L; Neurofilament triplet L protein; 68 kDa
neurofilament protein. Neurofilaments usually contain three intermediate
filament proteins: L, M, and H which are involved in the maintenance of
neuronal caliber. The extra mass and high charge density that distinguish the
neurofilament proteins from all other intermediate filament proteins are due to
the tailpiece extensions. This region may form a charged scaffolding structure
suitable for interaction with other neuronal components or ions. NF-L is the
most abundant of the three neurofilament proteins and, as the other
nonepithelial intermediate filament proteins, it can form homopolymeric 10-nm
filaments. Belongs to the intermediate filament family.
Neurofilaments usually contain three intermediate filament proteins: L, M, and H which are involved in the maintenance of neuronal caliber.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
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核糖核酸结合蛋白2抗体 Anti-PTBP2
INPP5F
特异性解旋酶抗体 Anti-SMARCA6/HELLS
4号染色体开放阅读款
Donkey Anti-Human
IgG H&L / PE-Cy5
C4orf45
卵泡抑素相关蛋白5抗体
胞粘蛋白结合调节蛋白抗体
PE-CY5标记的驴抗人IgG H&L
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FSTL5
植物1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(RuBisCO)elisa检测试剂盒免费代测
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大鼠胱天蛋白酶7(CASP7)elisa检测试剂盒
小鼠骨涎蛋白(BSP)elisa分析检测试剂盒
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BSPELISAkit
PSCDBP
IGFBP-2 ELISA kit
A型流感病毒PB1-F2抗体
仓鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa分析检测试剂盒
Influenza A PB1-F2
TNF-α ELISA kit
泛素蛋白连接酶J2抗体 Anti-UBE2J2
人对氧磷酶-3(PON3)elisa分析检测试剂盒
转录因子Pax6抗体 Anti-PAX6
PON3ELISAKit
低分子量神经丝蛋白抗体味觉感受器蛋白T2R38抗体 T2R38 研究领域;神经生物学 通道蛋白 G蛋白偶联受体 TTC30A蛋白抗体 TTC30A 研究领域;细胞生物 神经生物学 细胞粘附分子 细胞骨架 APC标记小鼠CD107b单克隆抗体 mouse CD107b/APC 抗体来源;Rat 酪蛋白激酶1γ1抗体 CSNK1G1 研究领域;细胞生物 信号转导 激酶和磷酸酶