一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ012751 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ012751 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ012751 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:POMT1
中文名称:蛋白甘露糖基转移酶1抗体
别 名;POMT1_HUMAN; Protein O-mannosyl-transferase 1;
Dolichyl-phosphate-mannose--protein mannosyltransferase 1.
研究领域; 细胞生物 神经生物学 糖蛋白
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应;(predicted: Human, Mouse, Rat,
Pig, Cow, Horse, )
产品应用;ELISA=1:5000-10000
IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;85kDa
细胞定位;细胞浆
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human POMT1: 651-747/747
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
POMT1 (Protein O
mannosyl transferase 1) is a multipass membrane protein that is found in the
endoplasmic reticulum. POMT1 catalyses the transfer of mannosyl residues to the
hydroxyl groups of serine or threonine residues. Enzymatic activity is
dependent on co expression of POMT1 with POMT2. Defects in the POMT1 gene are
associated with Walker-Warburg syndrome (WWS), a congential muscular dystrophy
that is associated with mental retardation and is usually lethal within the
first few months of life. Other defects in the POMT1 gene result in limb girdle
muscular dystrophy type 2K (LGMD2K), which is associated with mild mental
retardation. Studies in Drosophila suggest that mutation of POMT1 alters the
efficacy of synaptic transmission and a change in subunit composition of post
synaptic glutamate receptors at the neuromuscular junction. Missense mutations
in POMT1 have been associated with glioneuronal and glial brain tumours.
Transfers mannosyl residues to the hydroxyl group of serine or threonine residues. Coexpression of both POMT1 and POMT2 is necessary for enzyme activity, expression of either POMT1 or POMT2 alone is insufficient.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
钾通道相互作用蛋白2抗体 KChIP2
丁酸盐反应因子1抗体 ZFP36L1
节律蛋白2抗体 PER2
芳香烃受体抗体 AHR
3-羟氨苯甲酸双加氧酶抗体 HAAO
显色法,石蜡切片 50T
7号染色体开放阅读框46抗体 C7orf46
大鼠磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)elisa检测试剂盒
脑蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶29抗体 BRSK2
果菜果糖激酶法定量检测试剂盒
糖皮质受体抗体 Glucocorticoid receptor
动物血小板活性线粒体分离试剂盒
RNA结合基因蛋白3抗体 RBM3
小鼠端粒酶(TE)elisa检测试剂盒
RAS癌基因家族蛋白RAB40C抗体 RAB40C
10倍磷酸平衡盐(PBS)缓冲溶液
铜转运蛋白CUTC抗体 CUTC
人GMP-140elisa检测试剂盒
鸟苷酸环化酶α1/GCS-α-1抗体 Guanylyl Cyclase alpha 1
大鼠S100-A5蛋白(S100A5)elisa检测试剂盒
FITC标记小鼠Ly-6C单克隆抗体 mouse
Ly-6C/FITC
大鼠载脂蛋白B-48(ApoB48)elisa检测试剂盒
GA结合蛋白转录因子α/GABP-α抗体 GABPA
载玻片细胞CASPASE-1蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
氧固醇结合蛋白样10抗体 OSBPL10
小鼠D-乳酸脱氢酶(D-LDH)elisa检测试剂盒
遗传性血色病蛋白相关蛋白1抗体 HFE
细胞/组织裂解悬液、血液、体液等组蛋白ELISA定量试剂盒
蛋白甘露糖基转移酶1抗体p53调控PA26核蛋白抗体 PA26 研究领域;细胞生物 信号转导 生物钟蛋白3抗体 PER-3 研究领域;心血管 细胞生物 细胞周期蛋白 表观遗传学 活化半胱胺酸蛋白酶蛋白3抗体 caspase-3 p12 subunit 研究领域;细胞生物 信号转导 细胞凋亡 17β羟基类固醇脱氢酶13/17β-HSD13抗体 HSD17B13 研究领域;细胞生物 信号转导 新陈代谢 表观遗传学