一抗操作步骤:
一抗的操作步骤主要包括封闭、一抗孵育和洗涤。
封闭:这一步骤的目的是为了防止非特异性的蛋白质结合位点与抗体结合,从而引起非特异的染色和背景。通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂来封闭膜上的未结合位点,以降低抗体的非特异性结合。常用的封闭试剂有5%的BSA或脱脂奶粉,缓冲液一般选择PBST或TBST。封闭条件通常为室温或37℃缓慢摇动1~2小时,特殊情况也可4℃过夜。封闭完成后需要进行洗膜,以去除膜上未结合的封闭试剂。
一抗孵育:在一抗孵育之前,需要参考一抗的说明书,按照适当比例用封闭液稀释一抗。吸尽封闭液后,立即加入稀释好的一抗,室温或4℃在摇床上缓慢摇动孵育1~2小时。如果一抗孵育一小时效果不佳,可以在4℃缓慢摇动孵育过夜。然后回收一抗,加入Western洗涤液,在摇床上缓慢摇动洗涤5-10分钟,共洗涤3次。如果结果背景较高,可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
洗涤:洗涤的目的是为了洗去一抗的非特异性结合,洗涤的效果直接影响结果背景的深浅。建议使用PBST或TBST作为洗涤液,其中的Tween20有助于去除非特异性的结合,减少背景。洗涤的次数和时间根据具体实验来确定,建议清洗3-5次,每次5分钟。
货号 |
规格 |
价格 |
用途 |
BJ007796 |
50ul |
1380 |
仅供科研实验 |
BJ007796 |
100ul |
2380 |
仅供科研实验 |
BJ007796 |
200ul |
3480 |
仅供科研实验 |
商品属性:
英文名称:Ficolin 2
中文名称:弹性蛋白结合蛋白Fcn2抗体
别 名;37 kDa elastin-binding protein;
Collagen/fibrinogen domain containing protein 2; Collagen/fibrinogen
domain-containing protein 2; EBP 37; EBP-37; EBP37; FCN 2; Fcn2; FCN2_HUMAN;
FCNL; Ficolin (collagen/fibrinogen domain containing lectin) 2 (hucolin);
Ficolin B; Ficolin beta; Ficolin-2; Ficolin-B; Ficolin-beta; Ficolin2; Hucolin;
L ficolin; L-ficolin; OTTHUMP00000022518; P35; RP11 263F14.2; Serum lectin p35.
研究领域;心血管 细胞生物 细胞凋亡
抗体来源;Rabbit
克隆类型;Polyclonal
交叉反应; Human, (predicted: Mouse, Rat, )
产品应用;WB=1:500-2000
ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in
other applications.
optimal
dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量;31kDa
细胞定位;分泌型蛋白
性 状;Liquid
浓 度;1mg/ml
免 疫 原;KLH conjugated synthetic
peptide derived from human Ficolin 2/Ficolin B: 231-313/313
亚 型;IgG
纯化方法;affinity purified by Protein A
缓 冲 液;0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA,
0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
注意事项;This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
Ficolin B is the
designation in mouse and rat of a protein also known as L-ficolin, ficolin-2,
collagen/fibrinogen domain-containing protein 2, serum lectin p35, EBP-37 or
hucolin. Ficolin B is a 313 amino acid member of the ficolin lectin family. It
is a secreted innate immunity pattern recognition molecule expressed in liver
and plasma that forms a disulfide-linked homopolymer. This extensive N-terminal
disulfide bridge formation can lead to a functional dodecamer polypeptide.
Ficolin B binds to DNA ligands expressed by late apoptotic and necrotic cells
to increase attachment and engulfment. Variation in ficolin B concentrations
amongst individuals is associated with polymorphisms in the promoter and structural
portion of the FCN2 gene. In patients with Beh鏴t's disease (BD), there exists a significant difference in allele
frequency for FCN2 gene single nucleotide polymorphisms (SNPs) within the -557
and -64 promoter sites within HLA-B51 positive and HLA-B51 negative subgroups.
May function in innate immunity through activation of the lectin complement pathway. Calcium-dependent and GlcNAc-binding lectin. Enhances phagocytosis of S.typhimurium by neutrophils, suggesting an opsonic effect via the collagen region.
抗体注意事项:
确定抗体的名字和特性:注意抗体的中英文名字、它名、亚型等信息,这些信息对于选择正确的抗体至关重要。
明确实验类型:了解你的实验类型(如ELISA、WB、IHC、ICC或FACS),因为抗体的说明书通常会列出该抗体经验证过的实验类型。如果说明书没有提及某种应用类型,并不意味着该抗体不适用于该实验,只是表示尚未经过该实验验证。
选择适当的实验样本种属:确定你的实验样本是来自人类、小鼠还是大鼠等,因为抗体的说明书会列出该抗体经试验验证过的物种。
考虑样本蛋白的结构性质:了解样本蛋白的结构性质有助于选择的抗体,特别是当样本蛋白在提取和处理过程中可能会变性时,这会影响抗体的亲和反应。
单多克隆抗体的选择:单克隆抗体特异性强但亲和力相对小,而多克隆抗体特异性稍弱但亲和力强。根据实验需求选择合适的抗体。
注意抗体的特异性:原的类型对抗体对靶蛋白的特异性有显著影响。应选择针对已充分表征的原产生的抗体,避免使用不合适或质量差的原产生的抗体。
封闭液的选择:封闭液的选择应根据抗体说明书进行,常用的封闭液包括脱脂奶粉和BSA。封闭液的目的是封闭非特异性结合位点,降低背景噪音3。
抗体孵育注意事项:使用干净的孵育盒子,避免油脂等杂物沾到膜上造成非特异信号。如果一次性需要检测多个蛋白,可以考虑将膜剪开或采用其他技术如抗体洗脱液处理后再次使用膜
公司正在销售的产品:
磷酸化肌原调节蛋白抗体 phospho-MyoD1
(Ser200)
含普列克底物蛋白家族H成员3抗体 PLEKHH3
磷酸化嗜中性粒细胞胞浆因子1抗体 phospho-NCF1 (Ser359)
核因子κB抑制蛋白δ抗体 NFKBID
CSMD3蛋白抗体 CSMD3
绵羊环磷酸腺苷(cAMP)elisa分析检测试剂盒
DNAJC4蛋白抗体 DNAJC4
Western细胞裂解液100ml
神经外营养蛋白1抗体 NXPH1
冰冻切片b-葡糖苷酸酶活性染色试剂盒
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丙酮酸脱氢酶激酶功酶3抗体 PDK3
人甘露糖(Mannose)elisa检测试剂盒
半胱胺酸蛋白酶蛋白-6前体蛋白抗体 Caspase-6
蔗糖磷酸合成酶(SPS)测试盒
锌指蛋白271抗体 ZNF271
大鼠糖类抗原199(CA199)elisa检测试剂盒
生物素蛋白连接酶抗体 HLCS
植物线粒体形态染色试剂盒
NIFK蛋白抗体 NIFK
大鼠凋亡相关因子(FAS/CD95)elisa检测试剂盒
p21蛋白抗体 CDKN1A/p21
小鼠胎盘生长因子(PLGF)elisa检测试剂盒
转录因子E2F-2抗体 E2F2
人Toll作用蛋白(TOLLIP)elisa分析检测试剂盒
滋养层细胞抗原3β-HSD抗体 HSD3B1
组织络磷酸酶(TP)活性比色法定量检测试剂盒
弹性蛋白结合蛋白Fcn2抗体RAS癌基因家族蛋白RAB40A抗体 RAB40A 研究领域; 细胞生物 信号转导 G蛋白信号 碳酸氢钠协转运蛋白4-A5抗体 SLC4A5 研究领域; 细胞生物 神经生物学 信号转导 转运蛋白 胶原蛋白11A2抗体 Collagen XI alpha 2 神经生物学 信号转导 Ⅲ型纤维连接蛋白域蛋白8抗体 FNDC8 研究领域;细胞生物